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(無題) 削除/引用 No.692-4 - 2012/07/03 (火) 00:00:23 - qq BrdUを取り込ませたDNAの破壊は、Hoechst-dye(番号を失念した)で光増感できると聞いたように思います。BrdU　hoechstでpubmedを探してみてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.692-3 - 2012/07/02 (月) 18:47:57 - gr ありがとうございます。EdUを取り込ませた後にUV照射、その後click 反応でbiotinを付加させ、avidin-biotinの結合を利用して、新しく合成したDNA鎖およびその周辺にあるタンパク質を沈降させようと思っています。UVによってできたCPDや6-4PPで複製装置が停止し、その結果2重鎖切断ができてもいいのですが、UV照射によって"人工的に"DNA鎖ができる事を避けたいのです。click-itというEdU-biotinを利用したキットを販売しているインビトロジェンにも問い合わせてみたのですが、分からないと言う事でこのフォーラムにご相談させていただきました。 BrdUとことなり、EdUは1.DNA鎖に歪みを生じさせない 2.ハロゲンを用いていない の2点からphotolysisを生じさせにくいのではと思っていますが、詳しい方がいらっしゃればご教示いただきたいと思っております。 どうぞよろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.692-2 - 2012/07/02 (月) 17:27:32 - AP UVあてたらニックが入るのって、BrdU入っていてもいなくてもそうじゃない？ どういう観察を計画していて、そのなかでUV照射はなんのためにやるのかな？

EdU処理後のUV照射による細胞毒性 削除/引用 No.692-1 - 2012/07/02 (月) 15:21:09 - gr いつも大変参考にさせていただいております。 細胞周期を観察するときに、BrdUを取り込ませてDNA複製の度合を見ることがあると思いますが、UV照射下ではBrdUは崩壊するため、DNAにbreakが入ると聞いたことがあります。これはBrがハロゲンで光によって反応してしまうからだと思うのですが、最近良く使われるEdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)ではUV照射による細胞毒性の影響はどうなのでしょうか。 もしお分かりの方がいらっしゃれば教えていただければとおもいます。 どうぞよろしくお願いいたします。

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