Bio Technical フォーラム

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マウス 脊髄の摘出 トピック削除
No.6922-TOPIC - 2018/05/17 (木) 16:11:47 - shogo
初めてトピックを作らせて頂きます。よろしくお願い致します。

私は現在、C57BL/6マウス(8週齢)から脊髄の取り出しを試みています。
方法としましては、頭部離断後、脊椎周りの組織を除去し、棘突起を切り取ります。
その後、椎弓にハサミをいれ、椎弓を開き、脊髄を露出させます。

その後、脊髄神経を切り、脊髄を取り出そうと考えているのですが、脊髄が溶けたようになり、固体として取り出すことが困難で困っています。

クラッシュアイス上で冷却しながら作業しているのですが、冷却が甘いことも原因として考えられます。

以上のことにつきまして、冷却方法、また、良い摘出方法をご存知でしたらご教授頂けますと幸いです。


よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.6922-4 - 2018/05/18 (金) 12:50:58 - taka
AAさんとほぼ同じですが、
氷冷PBS(またはACSF)で灌流脱血後、氷冷PBS(同左)中で摘出でやっています。
うちは脳も取るので灌流しますが脊髄だけなら瀉血後浸漬で十分かも。

(無題) 削除/引用
No.6922-3 - 2018/05/18 (金) 12:12:04 - AA
WBなど、生でほしいのであれば冷やしたPBS中などで作業されてはどうでしょうか?
脊柱から脊髄を外すのではなく、脊髄から椎骨を外すイメージです。

(無題) 削除/引用
No.6922-2 - 2018/05/18 (金) 04:54:35 - タンパク初心者
取り出した後どうされますか?
もし組織染色等の実験を予定されるのであれば、私はまず固定をした上で脊髄を取られることをお勧めします。

マウス 脊髄の摘出 削除/引用
No.6922-1 - 2018/05/17 (木) 16:11:47 - shogo
初めてトピックを作らせて頂きます。よろしくお願い致します。

私は現在、C57BL/6マウス(8週齢)から脊髄の取り出しを試みています。
方法としましては、頭部離断後、脊椎周りの組織を除去し、棘突起を切り取ります。
その後、椎弓にハサミをいれ、椎弓を開き、脊髄を露出させます。

その後、脊髄神経を切り、脊髄を取り出そうと考えているのですが、脊髄が溶けたようになり、固体として取り出すことが困難で困っています。

クラッシュアイス上で冷却しながら作業しているのですが、冷却が甘いことも原因として考えられます。

以上のことにつきまして、冷却方法、また、良い摘出方法をご存知でしたらご教授頂けますと幸いです。


よろしくお願い致します。

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