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PDXのための腫瘍組織冷凍保存 トピック削除
No.6957-TOPIC - 2018/05/29 (火) 22:19:31 - TS
PDX用の検体を長期ストックのために冷凍保存しておりますが、
ラボバンカーを使って-20℃→-80℃(コンテナ使用)→液体窒素
でやっても、生着率が非常に悪く困っております。
対象は主に消化管癌なのです。
何か思いつきでも良いので、お知恵を拝借させてくださる方はいらっしゃいませんか。
 
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(無題) 削除/引用
No.6957-10 - 2018/06/13 (水) 11:41:05 - DX
遅れましたが保存容器のご紹介ありがとうございました。
臨床側の期待も高いのでどうしても慎重になりますね。

(無題) 削除/引用
No.6957-9 - 2018/06/06 (水) 20:21:49 - TS
NCIの手順書大変参考になりました。

Mr.Frostyを使っています。簡便です。
安いのでまずこちらで良いと思います。

(無題) 削除/引用
No.6957-8 - 2018/06/06 (水) 09:03:04 - DX
これからPDXを取扱う予定の者です。
NCIのSOPを参考にして計画しています。
https://pdmr.cancer.gov/sops/default.htm

プログラムフリーザーや保存容器が挙げられていますが、経験が無いので使い勝手についてどなたかご意見あると助かります。

補足3 削除/引用
No.6957-7 - 2018/05/30 (水) 22:23:13 - TS
3月のNatureにあるCryostorなど、ラボバンカー以外を使用されているご施設はございますか?

補足2 削除/引用
No.6957-6 - 2018/05/30 (水) 08:30:35 - TS
みなさま
ご返信ありがとうございます。
BALB/c-nu/nuを用いてます。
皆様のおっしゃるように、更に免疫不全のマウスを用いるのも1つ手段であると思っております。

(無題) 削除/引用
No.6957-5 - 2018/05/29 (火) 23:44:47 - たけちゃんマン
PDXのXはxenograft(異種間移植)です。そのため免疫不全マウスを用いることは必須です。

(無題) 削除/引用
No.6957-4 - 2018/05/29 (火) 23:37:53 - おお
In recent years, patient-derived xenografts (PDXs), where tumour fragments from patients are directly implanted in ***immunodeficient*** mice and then passed in vivo directly from mouse to mouse,

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5139018/

(無題) 削除/引用
No.6957-3 - 2018/05/29 (火) 23:00:01 - さかな
ヌードマウスではなくBALB/cを用いてるのですか?

ヌードマウスはT細胞はワークしていませんが、NK細胞はワークしているので、拒絶はそれなりに起こります。ですので生着率は悪いです
T細胞・NK細胞がワークしないNSGマウス(もしくはNOGマウス)を使ってみたらどうですか?

補足 削除/引用
No.6957-2 - 2018/05/29 (火) 22:20:45 - TS
PDXは3mm角の皮下移植で、マウスはBALB/cを用いてます。

PDXのための腫瘍組織冷凍保存 削除/引用
No.6957-1 - 2018/05/29 (火) 22:19:31 - TS
PDX用の検体を長期ストックのために冷凍保存しておりますが、
ラボバンカーを使って-20℃→-80℃(コンテナ使用)→液体窒素
でやっても、生着率が非常に悪く困っております。
対象は主に消化管癌なのです。
何か思いつきでも良いので、お知恵を拝借させてくださる方はいらっしゃいませんか。

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