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塩化アンモニウムによる赤血球溶血の温度 トピック削除
No.710-TOPIC - 2012/07/04 (水) 17:20:49 - momo
お世話になっております。

現在、マウス骨髄中の赤血球を塩化アンモニウムにより溶血除去することを考えています。
細胞内の酵素を失活させたいために、出来る限りすべての行程を4℃以下で行いたいと考えています。
しかし、一般的なプロトコール上は塩化アンモニウム溶液での溶血反応は室温(5分から10分)で行われています。

これはどのような理由からでしょうか。
また、4℃でも問題なく赤血球を除去できた方はいますでしょうか。

よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.710-4 - 2012/07/04 (水) 19:18:05 - よっしー
マウスの骨髄や脾臓,末梢血など色々溶血させています.
遠心分離しペレットの細胞が赤くなくなれば溶血は出来ています.

塩化アンモニウムによる赤血球溶血の温度 削除/引用
No.710-3 - 2012/07/04 (水) 18:04:15 - momo
よっしーさん

早速ありがとうございます。
ちなみに、それはマウス骨髄でしょうか。

また、溶血されているかどうかの確認はどのようにされていますでしょうか。

よろしくお願い致します。

(無題) 削除/引用
No.710-2 - 2012/07/04 (水) 17:46:53 - よっしー
私はいつも氷上で溶血していますよ.5分くらい反応させています.
溶血は問題なくします.
他にどのような影響があるのか無いのかは解りません.

塩化アンモニウムによる赤血球溶血の温度 削除/引用
No.710-1 - 2012/07/04 (水) 17:20:49 - momo
お世話になっております。

現在、マウス骨髄中の赤血球を塩化アンモニウムにより溶血除去することを考えています。
細胞内の酵素を失活させたいために、出来る限りすべての行程を4℃以下で行いたいと考えています。
しかし、一般的なプロトコール上は塩化アンモニウム溶液での溶血反応は室温(5分から10分)で行われています。

これはどのような理由からでしょうか。
また、4℃でも問題なく赤血球を除去できた方はいますでしょうか。

よろしくお願い致します。

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