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(無題) 削除/引用 No.7173-4 - 2018/08/25 (土) 21:50:05 - おお http://www.pnas.org/content/pnas/93/14/6924.full.pdf http://www.jbc.org/content/280/24/23363.full.pdf ２番目の文献のK-ras発現ベクターのReferenceが最初のやつでそこに人由来とかかれてます。細胞はいろいろ使われてますが、Rat由来のRIE-1やRat-1などが使われています。 人の培養細胞で癌化させるのが難しくOncogeneというか癌化の活性があるヒト遺伝子を培養細胞をつかって見つけたりするのに、げっ歯類の細胞を使うのが昔から確立された方法です。たいていマウスなのですが、そういう実験に使えるラットの細胞もあります。 癌化という観点ではという話で実験内容によっては適切でないかもしれません。N-rasだったかな、マウスのN-rasを人のN-rasに入れ替えて、Humanizedするという実験もあったように記憶してます。

(無題) 削除/引用 No.7173-3 - 2018/08/25 (土) 18:22:45 - moz 細胞のcDNAからKRAS遺伝子をPCR増幅してクローン化し、G12D変異をいれても良いかも。いろいろなバリエーションも簡単に作製できる。

(無題) 削除/引用 No.7173-2 - 2018/08/25 (土) 18:20:19 - moz アミノ酸配列を比べてみては。 おそらく相同性は高いので、ヒト由来CDSでも問題ないでしょう。 気になるなら、（目的や将来計画にもよるけど）CDSは600bp前後なので全合成しても安価でしょう。

ラット細胞へのKrasG12D遺伝子導入 削除/引用 No.7173-1 - 2018/08/25 (土) 15:08:34 - 実験初心者 　実験初心者で、細胞への遺伝子導入の知識・経験の少ない者です。 　このたびラットの細胞（非癌細胞）にKras変異（G12D）を導入したいと考えています。 　市販されているKrasG12D plasmidはラットのものなく、humanのもの（たとえばORF社KRAS (NM_004985) Human Mutant ORF Clone）しか見当たらなかったのですが、humanのラットの細胞には使えないでしょうか？ 　また、もし他に何か方法があれば教えて頂けると幸いです。 　宜しくお願い致します。

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