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HeLaでの細胞周期タイムラプス観察について トピック削除
No.7233-TOPIC - 2018/09/15 (土) 08:18:24 - YOUICHI
皆様いつも勉強させていただきありがとうございます。

中心体に関連した研究を開始しており、特定の遺伝子がM期にのみ細胞質から中心体周囲(PCM)に移行して機能するという仮説を考えています。
生化学的なデータではある程度の評価ができましたが、現在は局在評価の為に
顕微鏡観察を行いたいと考えています。

不勉強ながら今検討している実験としては
目的の遺伝子および中心体マーカーに蛍光(GFP,mCherry)タグをつけて発現させたHeLa細胞を長時間観察してM期周囲の振る舞いを観察したいと考えています。
しかしこの方法では24時間以上の長時間タイムラプス観察が必要であり、他に良い方法はないかなぁと考えております。

・細胞周期の研究に関しては全くの素人なのですが、このように特定の細胞周期(M期)の細胞の動態を評価したい、という時にどのような方法が良いのか、ご教授をいただけましたら幸いです。
どうぞよろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.7233-5 - 2018/09/17 (月) 18:09:56 - YOUICHI
おおさん

ありがとうございます。
確かにその通りだと思います。
広めに観察範囲をとって観察してみようと思います。
ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.7233-4 - 2018/09/15 (土) 16:13:06 - おお
同期させてなかったら、すぐにM期に入るものもある程度のポピュレーションで存在するよね。わたしがなにか勘違いしているのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.7233-3 - 2018/09/15 (土) 09:05:21 - YOUICHI
ご意見ありがとうございます。
実はfucciも考えたのですが、M期だと形態学的に「見たらわかる」のかなぁと思っており躊躇しておりました。
ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.7233-2 - 2018/09/15 (土) 08:32:13 - mon
the fluorescence ubiquitination cell cycle indicator (FUCCI)はどうかと思ったが、M期だと辛いかな。

HeLaでの細胞周期タイムラプス観察について 削除/引用
No.7233-1 - 2018/09/15 (土) 08:18:24 - YOUICHI
皆様いつも勉強させていただきありがとうございます。

中心体に関連した研究を開始しており、特定の遺伝子がM期にのみ細胞質から中心体周囲(PCM)に移行して機能するという仮説を考えています。
生化学的なデータではある程度の評価ができましたが、現在は局在評価の為に
顕微鏡観察を行いたいと考えています。

不勉強ながら今検討している実験としては
目的の遺伝子および中心体マーカーに蛍光(GFP,mCherry)タグをつけて発現させたHeLa細胞を長時間観察してM期周囲の振る舞いを観察したいと考えています。
しかしこの方法では24時間以上の長時間タイムラプス観察が必要であり、他に良い方法はないかなぁと考えております。

・細胞周期の研究に関しては全くの素人なのですが、このように特定の細胞周期(M期)の細胞の動態を評価したい、という時にどのような方法が良いのか、ご教授をいただけましたら幸いです。
どうぞよろしくお願い申し上げます。

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