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酢酸リチウム法について 削除/引用 No.7249-4 - 2018/10/04 (木) 11:25:04 - 653n

(無題) 削除/引用 No.7249-3 - 2018/09/25 (火) 15:53:52 - 653n >弘法さん 参考文献まで教えていただきありがとうございます。 LiAc溶液で洗いこんでなくても、LiAc/PEG溶液があれば形質転換できるんですね。 酵母の凍結保存読みましたけど、時短にはなるけども手間を鑑みるとあまり保存するメリットなさそうですね。効率はほとんど変わらないとは書いてありましたけど上手く凍結できないとそうも言えないですし。

(無題) 削除/引用 No.7249-2 - 2018/09/22 (土) 13:00:41 - 弘法 ライブラリーのスクリーニングなどではなく、決まったプラスミドを決まった酵母株に導入することが目的なら、それほど効率を気にする必要はないのでどちらでも良いでしょう。どの方法が効率が良いかは株によって異なることもあるので一概には言えません。 高効率を謳うキットもありますが、キットを使わない高効率な形質転換法として広く使われているのはPMID: 17401334の方法です。凍結保存については、PMID: 17401330にあります。

酢酸リチウム法について 削除/引用 No.7249-1 - 2018/09/21 (金) 14:12:47 - 653n 現在、S. cerevisiae に酢酸リチウム法を用いた2種類のプラスミドの導入を検討しています。 そこでプロトコルをいくつか読んだところ、数点気になることがありました。 1.　酵母培養後OD600が1〜2になった時点で集菌しTEに懸濁する方法と、1〜2になっ 　　た後に別の培地に移して数時間さらに培養してTEに懸濁する方法の違い 2.　ヒートショック前にDMSOを加える有無 3.　大腸菌のようにこのコンピテントセルは保存できないのか ご教授お願いします。

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