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(無題) 削除/引用 No.7331-5 - 2018/10/19 (金) 19:15:42 - よっしー 組織をホモジナイズして遠心した上清を濃縮するためにアセトン沈殿するのではなく，ホモジナイズした組織にアセトンを加えてるのですか？ そうであるなら溶けないのは当然のような気がしますが・・・ もし上清を使っているのであれば，おおさんのご指摘のように尿素を加えたり，ほかの界面活性剤を加える．あるいはSDS入のサンプルバッファーで溶けたものだけを流すのは問題があるのですかね？

(無題) 削除/引用 No.7331-4 - 2018/10/18 (木) 23:50:55 - おお いまあるけんだく液を使いたいなら尿素を飽和させた水溶液を室温でつくり等量くわえると約６Mになります。

(無題) 削除/引用 No.7331-3 - 2018/10/18 (木) 23:48:38 - おお ６M尿素、１０ｍMDTTにけんだくして、４度でO/N。または室温で数時間。超音波にかけれる容量ならかけると早いでしょう。 ただしサンプルバッファーを加えてからボイルしないこと。

(無題) 削除/引用 No.7331-2 - 2018/10/18 (木) 22:30:04 - ウエスタンできない 補足になります。 アセトン沈殿はこのようなプロトコルで行っております。 組織をホモジナイズ 氷冷したアセトンを5倍量添加 -20℃で2時間静置 12000gで10分遠心 上清を捨てる で行っております

アセトン沈殿 削除/引用 No.7331-1 - 2018/10/18 (木) 22:25:13 - ウエスタンできない 初めて書き込みます 鼠径部脂肪からタンパク質の抽出を行いたいです。教授からはアセトン沈殿を行い、タンパク質を抽出するように指導されました。 研究室にアセトン沈殿を行ったことのある人がいなかったのでネット等で調べて現在行っております。 しかし沈殿が完全に溶解せず、懸濁してしまいます。 何か良い方法があればご教授いただければと思います。 抽出したタンパク質はウエスタンブロットに使用します。 よろしくお願いします。

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