Bio Technical フォーラム

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アグロバクテリウム EHA105の薬剤耐性 トピック削除
No.7453-TOPIC - 2018/12/02 (日) 23:06:47 - A9r
いつもお世話になっています。
アグロバクテリウムEHA105の選択マーカーについて質問です。

アグロバクテリウムEHA105の形質転換を行っているのですが、入れたいbinary vecterの抗生物質はもちろん必要ですが、LBA4404と同様に、Ti plasmidが脱落しないようにstreptomycin(pEHA105用)を加える必要があると考えていたのですが、研究室のプロトコルにそのような記載はありませんでした。

実際にエレポ後、streptomycin 50 ug/mL +–で分けてプレートに分けて撒いてみたのですがコロニーの数に差はありませんでした。

Ti plasmidは抜けないものなのでしょうか?!
EHA105の形質転換の際にstreptomycinは不要なのでしょうか?
その理由も教えていただければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.7453-2 - 2018/12/03 (月) 13:52:46 - moz
専門外なので間違えているかもしれませんが、
元々Ti plasmidは安定に保持される性質である、and/or
Ti plasmidが脱落するとbinary vecterが維持(保持)できない=薬剤耐性でなくなる
からでは?

アグロバクテリウム EHA105の薬剤耐性 削除/引用
No.7453-1 - 2018/12/02 (日) 23:06:47 - A9r
いつもお世話になっています。
アグロバクテリウムEHA105の選択マーカーについて質問です。

アグロバクテリウムEHA105の形質転換を行っているのですが、入れたいbinary vecterの抗生物質はもちろん必要ですが、LBA4404と同様に、Ti plasmidが脱落しないようにstreptomycin(pEHA105用)を加える必要があると考えていたのですが、研究室のプロトコルにそのような記載はありませんでした。

実際にエレポ後、streptomycin 50 ug/mL +–で分けてプレートに分けて撒いてみたのですがコロニーの数に差はありませんでした。

Ti plasmidは抜けないものなのでしょうか?!
EHA105の形質転換の際にstreptomycinは不要なのでしょうか?
その理由も教えていただければ幸いです。

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