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(無題) 削除/引用 No.7471-6 - 2018/12/12 (水) 05:29:32 - touketu 皆さんご回答ありがとうございます。 意外と皆さんされているのですね。 特に問題も無さそうですのでこれでいきます。

(無題) 削除/引用 No.7471-5 - 2018/12/11 (火) 17:52:24 - asan 凍結培地の量によってはそれでいいでしょうが、普通の不死化細胞の場合は結構多めに凍結してあることが多いのでそれだけでは完全に溶けきらないことがあるため、若干溶かしてから多目の培地に入れて回収することが一般的だと思います。 ただし、iPS等で使われるガラス化法の場合は室温で数十秒晒すだけでも毒性がでるので、秒単位で希釈する必要がある場合がありますゆえに直接多目の培地で溶解してやることが一般的です。 ただし、通常のDMSO法やセルバンカー等の場合は多少モタモタした程度ですぐさま毒性が出るわけでもないし、そもそも凍結するときはゆっくり凍らせたりするので、普通はそこまで焦ってやる必要はないです。

(無題) 削除/引用 No.7471-4 - 2018/12/11 (火) 10:03:21 - PD iPS細胞をガラス化法で凍結したものは、温めた培地を凍ったチューブに直接加えて溶かしますね。その方が生存率がいいようです。

(無題) 削除/引用 No.7471-3 - 2018/12/10 (月) 19:53:21 - おお 凍結細胞のチューブに直接培地を入れてます

(無題) 削除/引用 No.7471-2 - 2018/12/10 (月) 16:38:10 - yuukai 37℃で半分とけた状態にして培地を入れるという流派は見たことありますよ。 DMSO溶液にさらす時間を減らしたいような感じでした。 37℃で完全にとかしてちょっとずつ培地を加えていくという流派も見たことあります。 細胞の環境を激変させないとか。

凍結細胞の融解の仕方について 削除/引用 No.7471-1 - 2018/12/10 (月) 16:29:55 - touketu 凍結細胞の解凍についてですが、一般的には37度ですばやく融解して培地に移す、という流れと思います。しかし、すばやい解凍がいいのであれば凍結細胞のチューブに直接培地を入れて解かしたほうがはやい気がします。これは常識的に考えると良くないでしょうか？ 細胞によっても違うかもしれませんし、結局のところ自分で比較して確認するべきかもしれません。しかし、生存率だけでなく機能の違いなども調べるとなると大変です。 そこで、常識的に考えておかしいのかをお伺いしたく、質問させていただきました。 よろしくお願いします。

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