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培地のpHについて トピック削除
No.7527-TOPIC - 2018/12/31 (月) 15:54:35 - iuagfar
題名の通り培地のpHについてです.

行っている細胞実験の都合上培養に使用する培地のpHが変化している可能性が考えられたのでpHを測定しました.

実験と同様の処理群とともにControl群として何も処理を行っていない培地のpHも測定したですが,Control群のpHが7.98という結果でした.
一般的に培養に使用可能なpHは高くとも8.0程度だとされていますが,それにしても高いように感じます.おそらく細胞を培養することでpHはある程度下がっていくものだと思いますが,細胞培養前の培地のpHが7.98というのは特に問題ないのでしょうか.

実際に最近これまでと異なる培地を使用し始めたため,そちらの作製に問題があるのかとも考えています.

無知で申し訳ありません.よろしくお願いします.
 
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(無題) 削除/引用
No.7527-6 - 2019/01/26 (土) 19:42:06 - aa
あくまでインキュベーター内でpH保たれるだけなので、Medium瓶の蓋が緩んでいたりすると培地pHはすぐにあがってしまいます
つくってすぐの培地でもpH高いのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.7527-5 - 2019/01/13 (日) 11:12:05 - iuagfar
返信が遅くなり申し訳有りません。

DMEMに5%FBSに10%HS、1%抗生剤です。

よろしくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.7527-4 - 2018/12/31 (月) 19:06:18 - おお
その培地の名前とかレシピとか開示できますか?

(無題) 削除/引用
No.7527-3 - 2018/12/31 (月) 18:16:41 - おお
CO2インキュベーターを使っているならば、取り出して培地をpH測定用容器に移して計るまでの間にも動いている可能性はあると思いますが。

もし可能ならHEPESなどで安定化するといいのかもしれません

(無題) 削除/引用
No.7527-2 - 2018/12/31 (月) 17:25:28 - mom
CO2インキュベーター・培地のコンタミ等ではないとして、
>細胞培養前の培地のpHが7.98というのは特に問題ないのでしょうか
実験目的にもよると思います。
どのような培地か不明ですが、薬剤やサプリメント剤の影響でやや高めになることはありました。

古典的なDMEM培地の処方は8% CO2 存在下でpH7.2-7.4あたりになます。そのため5%CO2 存在下だとやや高めになります。血清成分でややpHが下がるので、通常は問題ないと思います。
メーカーによっては5%CO2 存在下で合うように、原法から炭酸水素ナトリウム濃度を変えている(下げている)ことがありますのでご確認ください。

培地のpHについて 削除/引用
No.7527-1 - 2018/12/31 (月) 15:54:35 - iuagfar
題名の通り培地のpHについてです.

行っている細胞実験の都合上培養に使用する培地のpHが変化している可能性が考えられたのでpHを測定しました.

実験と同様の処理群とともにControl群として何も処理を行っていない培地のpHも測定したですが,Control群のpHが7.98という結果でした.
一般的に培養に使用可能なpHは高くとも8.0程度だとされていますが,それにしても高いように感じます.おそらく細胞を培養することでpHはある程度下がっていくものだと思いますが,細胞培養前の培地のpHが7.98というのは特に問題ないのでしょうか.

実際に最近これまでと異なる培地を使用し始めたため,そちらの作製に問題があるのかとも考えています.

無知で申し訳ありません.よろしくお願いします.

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