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ジギトニンがすぐに析出します トピック削除
No.7579-TOPIC - 2019/01/19 (土) 19:57:38 - おおぎ
ラット肝ミトコンドリアから亜ミトコンドリア粒子を調製する際に使用する12 mg/mlジギトニン溶液が溶解させても析出を繰り返してしまい、扱いに苦戦しています。

使用しているジギトニンは和光のものを使用しており、溶解は以下のように行っています。

ジギトニンにメディウム(70 mMスクロース、220 mMマンニトール、2 mM Hepes)を加え、ホットスターラーを用いて90℃で撹拌。ジギトニンが溶解した後、プラッテ上で室温まで戻す。

室温に戻している段階で毎回析出が見られます。

皆様はどのようにジギトニンを溶解されていますでしょうか?
 
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No.7579-5 - 2019/01/21 (月) 13:14:33 - おおぎ
和光の生化学用ジギトニンが可溶性を上げたもののようでした。

現在手元には、和光の他にナカライテスクのジギトニンがあるため、
ナカライテスクのものを使用するか、和光の特級試薬を使用するかで検討しようと考えています。

ナカライテスクのジギトニンを使用された方はいらっしゃらいないでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.7579-4 - 2019/01/21 (月) 10:23:43 - おおぎ
>まず、プロトコールとてもちのジギトニンを確認してください。
プロトコルには別段の記載がありませんでした。
手持ちのジギトニンは和光特級のものです。
おそらく、従来売られていたものの方かと思います。
和光の生化学用として売られているものが、不溶性画分を取り除いたものになるのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.7579-3 - 2019/01/20 (日) 00:17:46 - AP
http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;Code=2827

(無題) 削除/引用
No.7579-2 - 2019/01/19 (土) 20:34:40 - おお
まず、プロトコールとてもちのジギトニンを確認してください。ジギトニンは2種類あって、もともとうられていたジギトニンと、それを溶かして不溶成分を除いて凍結乾燥したものと2種類あります。後者は昔は研究者がやっていた方法ですが、それを商品として扱うようになったものです。

ジギトニンがすぐに析出します 削除/引用
No.7579-1 - 2019/01/19 (土) 19:57:38 - おおぎ
ラット肝ミトコンドリアから亜ミトコンドリア粒子を調製する際に使用する12 mg/mlジギトニン溶液が溶解させても析出を繰り返してしまい、扱いに苦戦しています。

使用しているジギトニンは和光のものを使用しており、溶解は以下のように行っています。

ジギトニンにメディウム(70 mMスクロース、220 mMマンニトール、2 mM Hepes)を加え、ホットスターラーを用いて90℃で撹拌。ジギトニンが溶解した後、プラッテ上で室温まで戻す。

室温に戻している段階で毎回析出が見られます。

皆様はどのようにジギトニンを溶解されていますでしょうか?

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