Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

免疫蛍光染色 切片の封入のコツ トピック削除
No.7649-TOPIC - 2019/02/04 (月) 17:43:05 - sasanin
マウスの脳組織の凍結切片を免疫染色し、封入する際、小さな泡がたくさん混入してしまい困っています。封入剤には、ProlongGoldを使用しています。見たかぎりPeolongGold自体に泡は見えません。
見たい部分に重なっているときには、軽く押さえて動かすことで対処していますが、そもそも混入させないような方法があれば教えていただきたいです。
また、PBSでWashした後風乾させ、それから封入しているのですが、乾燥させない方がよいでしょうか。
これらについて教えていただきたいです。よろしくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.7649-5 - 2019/02/05 (火) 13:55:48 - AP
そもそもあんまり、乾かしてからマウントという発想がなかった。
特殊な場合にはやらいでもないが

(無題) 削除/引用
No.7649-4 - 2019/02/05 (火) 13:40:33 - hana
うちは乾かしません。

その方が馴染むので。

(無題) 削除/引用
No.7649-3 - 2019/02/05 (火) 10:35:16 - sasanin
ありがとうございます。温度については考えていませんでした。冷蔵保存してしまっていたので、それも関係しているのかもしれません。かぶせ方もおすすめしてくださった方法でやってみようと思います。
それからもう一つお聞きしたいのですが、最後のWashをした後はすぐに封入されていますか。それとも、ある程度乾燥してからですか。

(無題) 削除/引用
No.7649-2 - 2019/02/04 (月) 17:58:16 - AP
封入剤が冷蔵保存されている場合(ProlongGoldは室温保存のようですが)、冷えたまま使うと温まったときにとけていたガスが放出されて気泡になります。
あらかじめ室温に慣らすかdegasをしてから使う。

カバーグラスのかぶせ方にもよるでしょう。傾けたカバーグラスを上からパタンとかぶせると気泡が入りやすいように思います。
私は、可能であれば、平らな台に置いたカバーグラスの方に封入剤を垂らしておき、そこにスライドグラスを上から近づける方法を取ります。
封入剤がスライドグラスに触れた瞬間、表面張力でカバーグラスが吸い上げられて張り付きます。

免疫蛍光染色 切片の封入のコツ 削除/引用
No.7649-1 - 2019/02/04 (月) 17:43:05 - sasanin
マウスの脳組織の凍結切片を免疫染色し、封入する際、小さな泡がたくさん混入してしまい困っています。封入剤には、ProlongGoldを使用しています。見たかぎりPeolongGold自体に泡は見えません。
見たい部分に重なっているときには、軽く押さえて動かすことで対処していますが、そもそも混入させないような方法があれば教えていただきたいです。
また、PBSでWashした後風乾させ、それから封入しているのですが、乾燥させない方がよいでしょうか。
これらについて教えていただきたいです。よろしくお願いいたします。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。