Bio Technical フォーラム

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ヒアルロン酸の回収 トピック削除
No.7820-TOPIC - 2019/04/13 (土) 12:36:08 - HA
いつも勉強させていただいております。

現在、動物細胞由来のヒアルロン酸の回収を試みています。

乳酸菌の場合、菌体培養液に終濃度0.1% SDS溶液を加えた後にエタ沈でヒアルロン酸を回収する方法をよく見かけます。

しかし、同じ操作を培養細胞で行ったところ、エタ沈後のペレットは水に全く溶けませんでした。

別の界面活性剤で試してみるしか思い付かないのですが、何かアドバイスをいただければ幸いです。

よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.7820-4 - 2019/04/14 (日) 02:16:35 - おお
SDSをつかうとDNaseがしっかつしてつかえないから。

また5mMぐらいのMgClをくわえて低張のじょうたいでTritonをつかうと核は壊れにくいので、核(DNA)を除いてからエタチンできる。

(無題) 削除/引用
No.7820-3 - 2019/04/13 (土) 18:51:53 - HA
> DNAとか混じってませんか?細胞はまずTritonなどでLysisしてDNaseしょりしてからエタチンしてはどうでしょうか?

おそらく混じっていると思います。detergentを変えるのとDNase処理は前向きに
検討したいと思います。
よろしければSDSではなく、tritonを用いるメリットをご教示いただけないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.7820-2 - 2019/04/13 (土) 13:27:39 - おお
DNAとか混じってませんか?細胞はまずTritonなどでLysisしてDNaseしょりしてからエタチンしてはどうでしょうか?

ヒアルロン酸の回収 削除/引用
No.7820-1 - 2019/04/13 (土) 12:36:08 - HA
いつも勉強させていただいております。

現在、動物細胞由来のヒアルロン酸の回収を試みています。

乳酸菌の場合、菌体培養液に終濃度0.1% SDS溶液を加えた後にエタ沈でヒアルロン酸を回収する方法をよく見かけます。

しかし、同じ操作を培養細胞で行ったところ、エタ沈後のペレットは水に全く溶けませんでした。

別の界面活性剤で試してみるしか思い付かないのですが、何かアドバイスをいただければ幸いです。

よろしくお願いいたします。

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