Bio Technical フォーラム

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コロニー形成率を高くしたいです トピック削除
No.7825-TOPIC - 2019/04/16 (火) 16:02:36 - エル
先輩に教えてもらいながら
細胞のコロニー形成を行い、計算したところ
先輩は70%、私は40%のコロニー形成率でした。

播種数は100個、200個、300個で各n=6です。

PBS、培地、トリプシンなどは同じものを使っています。

細胞のカウントは機械を使っています。

先輩と同じ細胞(同じシャーレで培養していたもの)を使って
アドバイスを受けながら実験をしましたが、30%も差がついてしまいました。

形成率を高くするためのコツなどありましたら教えて欲しいです。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.7825-4 - 2019/04/25 (木) 09:29:56 - エル
色々とアドバイスをしていただき
ありがとうございます。

指摘していただいた部分を検討しつつ
実験をしていこうと思います!

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.7825-3 - 2019/04/18 (木) 02:07:04 - おお
加えてピペッティングが強すぎるとかも原因になることがあります。40%なら半分以上が浮いているか底についたまま調子が悪くなり死んでいるということになります。そのあたりの観察もよくしてみてください。カウントがもともと正確でなかったとか、希釈したときのロスも念の為考慮に入れてください。

(無題) 削除/引用
No.7825-2 - 2019/04/17 (水) 07:03:25 - moz
「優しく」扱う事でしょうか。
例えば、
トリプシン処理時間を短く、回収時や懸濁時のストレスを減らす、遠心力・時間を出来るだけ減らす、作業時(各種溶液)の温度(低温が良いか常温〜37℃が良いか)に気を付ける、全体の作業時間の短縮等。
浮遊培養のHL60だったかな、遠心にとても弱い細胞もありました。

コロニー形成率を高くしたいです 削除/引用
No.7825-1 - 2019/04/16 (火) 16:02:36 - エル
先輩に教えてもらいながら
細胞のコロニー形成を行い、計算したところ
先輩は70%、私は40%のコロニー形成率でした。

播種数は100個、200個、300個で各n=6です。

PBS、培地、トリプシンなどは同じものを使っています。

細胞のカウントは機械を使っています。

先輩と同じ細胞(同じシャーレで培養していたもの)を使って
アドバイスを受けながら実験をしましたが、30%も差がついてしまいました。

形成率を高くするためのコツなどありましたら教えて欲しいです。

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