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昆虫細胞(Sf9)に抗生剤を加えてもいいでしょうか? トピック削除
No.7837-TOPIC - 2019/04/23 (火) 06:04:08 - Sf9
いつも勉強させてもらっています。
インキュベータにてSf9細胞を培養し始めました。
Sf900-IIIを使用しています。

しかし細菌によるコンタミが頻繁に起こっています。
そのインキュベータは昆虫細胞用にとラボから私に割り当てられたもので、私以外には使用していません。

おそらくインキュベータか、細胞そのものがコンタミしているのではないかと考えています。
(かなり気を付けて操作していたため)

そこで質問なのですが、抗生剤を加えて培養をしてもいいのでしょうか?
もちろん抗生剤を加えない、とは書かれてはいますが...

大変困っています。どうかよろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.7837-4 - 2019/04/23 (火) 12:13:10 - えsrdgtvhbjn
分与された細胞の場合、もとが汚染してることはよくあります。Sf9なら比較的ひろく使われている細胞のようにおもいますので、信頼できるところどこかから再度入手されるのがいちばんよいとおもいます。

実験の目的等から抗生剤をいれてはいけないという具体的な理由がないならば入れていいです。一般的なものでよいとおもいますが、必要ならばこの細胞の場合、みなさん何をいれてるのかは先行研究で確認ください。
インキュベータ、その他、実験環境からの原因が考えられるならば、とりあえずfilter付きフラスコで培養した方がいいです(口を完全に閉じることができるので、フィルターを介さずには外気が流入しないので)。あと意外と多いのが、エアコンです。(天井のあまり高くない狭い部屋の場合はとくに)エアコンの気流が顕微鏡のステージとかインキュベータとかに向かって流れているとかなり高い頻度でコンタミします。これに注意して配置を変えただけで解決したことあります。

(無題) 削除/引用
No.7837-3 - 2019/04/23 (火) 11:20:49 - moz
Sf900-IIIでは無く、Sf900-IIだったかもしれませんが、
ゲンタシン80ug/mLまたは、カナマイシン50ug/mLを添加していました。
リポフェクション時には抗生剤を抜いていました。

昆虫細胞(Sf9)に抗生剤を加えてもいいでしょうか? 削除/引用
No.7837-1 - 2019/04/23 (火) 06:04:08 - Sf9
いつも勉強させてもらっています。
インキュベータにてSf9細胞を培養し始めました。
Sf900-IIIを使用しています。

しかし細菌によるコンタミが頻繁に起こっています。
そのインキュベータは昆虫細胞用にとラボから私に割り当てられたもので、私以外には使用していません。

おそらくインキュベータか、細胞そのものがコンタミしているのではないかと考えています。
(かなり気を付けて操作していたため)

そこで質問なのですが、抗生剤を加えて培養をしてもいいのでしょうか?
もちろん抗生剤を加えない、とは書かれてはいますが...

大変困っています。どうかよろしくお願いいたします。

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