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ウェスタンの一次抗体反応時間 トピック削除
No.7838-TOPIC - 2019/04/23 (火) 09:27:22 - たなか
こんにちは。
ウェスタンの一次抗体、普段はオーバーナイトで行なっているのですが、急用が入ってしまいオーバーナイトで検出できそうにありません。
一次抗体を2日反応させるのはやはり汚くなりますよね?
 
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No.7838-7 - 2019/04/23 (火) 12:36:16 - 解決
皆さんありがとうございます!

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No.7838-6 - 2019/04/23 (火) 12:12:51 - あ
既にみなさんが仰っている通り、数日間のオーバーナイトはそれほど問題ない場合が多いかと思います。
反応時間の長さが気になるようでしたら液中の抗体濃度を下げるなどの対処をしてみてはどうでしょうか。

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No.7838-5 - 2019/04/23 (火) 12:02:02 - み
2晩反応はたまにやる。大概問題なく検出できると思う。もちろんS/N比の問題だから抗体・サンプルの質による。
汚くなったら検出後に軽くstripしてやり直せば良い。何事も経験。

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No.7838-4 - 2019/04/23 (火) 10:49:28 - えsrdgtvhbjn
抗体の品質とか精製度で左右されるので一概にはいえないです。精製度が今一で関係ない抗体が含まれている割合が多ければ、普段目立たなかった反応が強く出ることもあるとおもいますし、もともと非特異的な反応がでる傾向があればなおさらですし。可能ならばブロッキングする前の段階でタッパー中あるいはシールしたハイブリバック中で水に沈めた状態で冷蔵庫に入れとくのが一番安心とおもいます。経験ではすくなくとも1週間程度は結果に影響するようなことはないです。

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No.7838-3 - 2019/04/23 (火) 10:05:00 - 独り言
希釈液がミルクなら腐るので、防腐剤を入れるなりしないと心配です。
それ以外には、バックグランドがある程度上がるかもしれませんが、基本的には4度においておけば大丈夫でしょう。

(無題) 削除/引用
No.7838-2 - 2019/04/23 (火) 09:47:08 - ま
金曜に付けて月曜まで放置することもありますが特に問題なくできています.

ウェスタンの一次抗体反応時間 削除/引用
No.7838-1 - 2019/04/23 (火) 09:27:22 - たなか
こんにちは。
ウェスタンの一次抗体、普段はオーバーナイトで行なっているのですが、急用が入ってしまいオーバーナイトで検出できそうにありません。
一次抗体を2日反応させるのはやはり汚くなりますよね?

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