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(無題) 削除/引用 No.786-7 - 2012/07/31 (火) 08:54:37 - masamune ありがとうございました。 sher stressで調べてみましたが、今回の自分の現象に合うような内容はみつかりませんでした。 早く震盪すると活きが良くなるということで、あまり深く考えずにおこうと思います。 皆様、アドバイスありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.786-6 - 2012/07/26 (木) 19:04:43 - ンンノ エアレーションが違うんじゃないでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.786-5 - 2012/07/26 (木) 18:01:33 - ~ 振盪速度ではなくshear stressで検索してはいかがでしょうか。 動物細胞では、shear stressでhsp60が誘導されるという報告はあるようですね。

(無題) 削除/引用 No.786-4 - 2012/07/26 (木) 17:39:39 - Q ＞通常時と比べて、菌体の収量は変わりませんでした。 ？菌の数が変わるとかじゃなくて、何と言うか「活きがいい」ということを言いたかったのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.786-3 - 2012/07/26 (木) 15:08:00 - masamune コメントありがとうございます。 ＞いい感じで揺さぶられると菌の生育がよくなって 通常時と比べて、菌体の収量は変わりませんでした。 特に、深く考える必要はないと思うのですが、気になったので、もしご存知の方がいらっしゃれば、と思い質問させていただきました。

(無題) 削除/引用 No.786-2 - 2012/07/24 (火) 13:22:36 - 深く考える？ >以上のことから、フラスコの震盪速度を上げるとシャペロンが誘導されるのではないかと考えられるのですが、 いい感じで揺さぶられると菌の生育がよくなって、結果色々なタンパク質が作られて それに伴ってシャペロンも必要になるから相対的に発現があがっただけでは？

大腸菌を用いたタンパク質発現の震盪速度について 削除/引用 No.786-1 - 2012/07/24 (火) 11:15:57 - masamune 大腸菌にGST融合タンパク質を発現させ、精製を試みています。 これまでの結果から、実験の際、タンパク質発現誘導時に、フラスコの震盪速度を早くすると目的のタンパク質が得られることがわかりました（通常は120rpm/minで、早くした場合は190rpm/min）。通常の震盪速度では目的タンパク質を得ることはできません。 目的のタンパク質はHspと思われるタンパク質と一緒にとれてきたことから、目的タンパク質とHspが適度に存在する条件だと、目的タンパク質を得ることが出来るのではないかと考え、EtOHでシャペロンを誘導し、通常の震盪速度で実験してみたところ、目的タンパク質を得ることが出来ました。 以上のことから、フラスコの震盪速度を上げるとシャペロンが誘導されるのではないかと考えられるのですが、皆様はこのような経験はありますでしょうか。 論文をいろいろとあたったのですが、該当するような事柄について書かれているものはなかったので、質問させていただきました。 よろしくお願いします。

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