Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

CD11b/CD14 マクロファージ/単球系 トピック削除
No.7865-TOPIC - 2019/05/04 (土) 23:29:17 - Flow 素人
ヒト組織(大腸など)からソーターでマクロファージ/単球系を単離したいと考えています。

ソーターで用いることができる色が少ないため、CD45を用いず、CD11b/CD14のみで単離したいと考えています。

調べている限り、CD11b/CD14は、血球系細胞以外に出ていないようです。

やはり、CD45は必須でしょうか?あるいは、CD11b/CD14 は、炎症部位などが起こっている血球系以外の細胞に出ているでしょうか?

素人質問で誠にすいません。

よろしくお願い申し上げます。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.7865-5 - 2019/05/06 (月) 00:36:11 - X
大腸ではなく小腸ですが、論文が出ているようなので、参考にされると良いと思います。

ttp://jem.rupress.org/content/215/2/441

マクロファージのマーカーは組織によって異なる場合があります。上記論文を見る限り、ヒト小腸のマクロファージではCD11b陰性のポピュレーションがメインのようなので、2色で行くならばHLA-DRとCD14の方が良いかもしれませんね。メインのCD11b陰性マクロファージではCD14の発現が低いですので、ソートの際には気をつけた方が良いですね。FSC/SSCや自家蛍光レベルでダブルチェックできると思います。

ソートで使えるカラーに制限があるようでしたら、ソートに行く前に、CD45、CD11c(HLA-DRを使う場合はDCのコンタミを見るのに必要と思われます)、CD64などを組み合わせたマルチカラーで解析(ソートなし)だけやってみて、これらのマーカーを外しても大丈夫か確認しておくと良いと思います。個人的な印象では、2色ではちょっと厳しい気がしますが、まずは調べて見る事が大切と思います。

P様 有難うございます 削除/引用
No.7865-4 - 2019/05/05 (日) 13:04:32 - Flow 素人
P様 有難うございます。

>マクロファージならF4/80とかよく使われてるよ。CD11bよりはもっとマクロファージ特異的と言える。

人では、F4/80が使用できなくて、何か、良いマーカーがないかなーと思っていたしだいです。CD14だと、MΦに分化すると発現が弱くなってきてしまうので、単利が難しいなーと思っていたしだいです。

(無題) 削除/引用
No.7865-3 - 2019/05/05 (日) 03:09:09 - P
マクロファージならF4/80とかよく使われてるよ。CD11bよりはもっとマクロファージ特異的と言える。
マクロファージもM1, M2 中間型とかいろいろあるからね。発現してなかったり発現していても発現レベルもちがうかもしれないものもあると思うのでその辺も注意したほうがいいかも。

追記 削除/引用
No.7865-2 - 2019/05/04 (土) 23:31:09 - Flow+素人
このトピックを書いたものです。

CD68は細胞内染色ですので、マーカーとして使用できません。

マクロファージの単離のために良いマーカーなどがあったら教えてください。

CD11b/CD14 マクロファージ/単球系 削除/引用
No.7865-1 - 2019/05/04 (土) 23:29:17 - Flow 素人
ヒト組織(大腸など)からソーターでマクロファージ/単球系を単離したいと考えています。

ソーターで用いることができる色が少ないため、CD45を用いず、CD11b/CD14のみで単離したいと考えています。

調べている限り、CD11b/CD14は、血球系細胞以外に出ていないようです。

やはり、CD45は必須でしょうか?あるいは、CD11b/CD14 は、炎症部位などが起こっている血球系以外の細胞に出ているでしょうか?

素人質問で誠にすいません。

よろしくお願い申し上げます。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。