Bio Technical フォーラム

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赤血球膜のウエスタンブロット トピック削除
No.7889-TOPIC - 2019/05/14 (火) 19:41:06 - はま
いつも勉強をさせていただいております。

さて、赤血球膜のウエスタンブロットを計画しています。

赤血球からのタンパク抽出は初めてで、文献等を調べても十分な情報が得られなかったので、ご経験のある方がいましたら、ご教授下さい。

@ 低張液あるいは凍結融解後に洗浄を行い、ヘモグロビンの影響を除去した後、RIPAバッファーで溶解すればよろしいでしょうか。他にいい方法がありますか。

A どれくらいの赤血球量(例えば個数)を溶解すればウエスタンブロットが実施できるようなタンパク濃度を得ることができますでしょうか。

よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.7889-3 - 2019/05/15 (水) 02:37:25 - おお
https://link.springer.com/content/pdf/10.1007/BF01795474.pdf

(無題) 削除/引用
No.7889-2 - 2019/05/15 (水) 01:31:13 - おお
具体的なプロトコールを書いたほうがよろしいのではないかと、、、

赤血球膜のウエスタンブロット 削除/引用
No.7889-1 - 2019/05/14 (火) 19:41:06 - はま
いつも勉強をさせていただいております。

さて、赤血球膜のウエスタンブロットを計画しています。

赤血球からのタンパク抽出は初めてで、文献等を調べても十分な情報が得られなかったので、ご経験のある方がいましたら、ご教授下さい。

@ 低張液あるいは凍結融解後に洗浄を行い、ヘモグロビンの影響を除去した後、RIPAバッファーで溶解すればよろしいでしょうか。他にいい方法がありますか。

A どれくらいの赤血球量(例えば個数)を溶解すればウエスタンブロットが実施できるようなタンパク濃度を得ることができますでしょうか。

よろしくお願いいたします。

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