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(無題) 削除/引用 No.7925-6 - 2019/05/29 (水) 07:05:36 - mom 遺伝子導入が細胞に与える影響ついては、以下の論文などがあります。 doi.org/10.2144/000113132 どのような試薬でも影響があると考えたほうが良いでしょう。 なお、一般的に導入試薬のみより導入試薬＋核酸の方が細胞毒性は高いので、ネガティブコントロールは導入試薬＋DNA（インサートなし発現ベクターやレポーター遺伝子等）が良いでしょう。 また経験的にウィルスベクターの方が（導入時の）影響が少ないようですが、これは量的効果（必要なウィルスタンパクや核酸量が少ない）なのかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.7925-5 - 2019/05/29 (水) 02:03:39 - おお Lipofectamineで導入するものと同じ性質のものをネガコンとして使うのが普通（発現ベクターならネガコンとしてインサートが入ってないベクターとか）。このことからでもTransfectionという行為が何らかの影響を与えている可能性があるからその影響を差し引きできるようなコントロールを置かないとデーターの信憑性が無いという事。 Lipofectamineで何らかの影響があっても不思議でないし、LipofectamineとそのDNA複合体で作用の程度が変わっても何ら違和感がないです。 Lipofectamineは入れっぱなしですか？もしそういう影響を最小限に抑えたいならTransfectionの数時間から２４時間後に培地を交換するといくらかは影響をキャンセルできると思います。

(無題) 削除/引用 No.7925-4 - 2019/05/28 (火) 21:15:07 - 悲しみの男 すいません、文章途切れておりました。 ご返信ありがとうございます。 分かりづらく申し訳ございません。 mimicはmiRNAを導入した細胞株を指しております。 miRNAが入っていない導入試薬のみで増殖を認めた という事です。

(無題) 削除/引用 No.7925-3 - 2019/05/28 (火) 21:12:41 - 悲しみの男 ご返信ありがとうございます。 分かりづらく申し訳ございません。 mimicはmiRNAを導入した細胞株を指しております。 miRNA

(無題) 削除/引用 No.7925-2 - 2019/05/28 (火) 20:52:02 - 遠さく推し 違いが分からないのですが…ミミックとは？要はDNAなしで増殖が上がるってことですか？分からない文章が…

トランスフェクション試薬で細胞増殖促進？ 削除/引用 No.7925-1 - 2019/05/28 (火) 13:08:13 - 悲しみの男 お世話になっております。 miRNAをトランスフェクションして細胞増殖アッセイ（MTS）を行っております。導入試薬はLipofectamineとOpti-MEMで行い、予備実験でNon-treatment,mimic,mock,Lipofectamine＋Opti-MEMのみでトリプリケイトで行っております。細胞の増殖がLipofectamine＋Opti-MEMのみが一番高くなってしまいました。メーカーに問い合わせた所、Lipofectamineでそういった効果がある可能性もある、濃度を下げてみてはと助言を頂きました。皆様はこのような事は起こりましたでしょうか？

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