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PEとPIのコンペンセーション トピック削除
No.7993-TOPIC - 2019/06/18 (火) 06:42:02 - PEI
質問させてください。
現在、FACSCelestaを利用して、EGFP, PE, Alexa647で多重染色解析しています。

死細胞を除去する必要があり、PIを用いたいのですが、PIとPE間の蛍光補正でエラーが生じてしまいました。

この二つは一緒に用いることはできないのでしょうか?
ご教授いただけますと幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.7993-3 - 2019/06/18 (火) 17:01:17 - mp
PIはPEにかなり被ってくるのでそもそも蛍光補正しようとするところに無理がある。
saiさんもおっしゃっているようにどうせ死細胞除去するのだから、PIのシグナルを拾っているチャネルに他の蛍光が漏れ込まない補正さえできていれば問題ない。あとは7AADを使うとか。

(無題) 削除/引用
No.7993-2 - 2019/06/18 (火) 12:35:54 - sai
PIが濃すぎる?

死細胞をPIで除く、つまり目的の生細胞はPI(-)だから、
PIとPEでコンペンセーションしなくても、構わないと思いますが。

PEとPIのコンペンセーション 削除/引用
No.7993-1 - 2019/06/18 (火) 06:42:02 - PEI
質問させてください。
現在、FACSCelestaを利用して、EGFP, PE, Alexa647で多重染色解析しています。

死細胞を除去する必要があり、PIを用いたいのですが、PIとPE間の蛍光補正でエラーが生じてしまいました。

この二つは一緒に用いることはできないのでしょうか?
ご教授いただけますと幸いです。

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