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(無題) 削除/引用 No.8026-3 - 2019/06/26 (水) 03:43:17 - あかね やはりタンパク質レベルで見れた方がいいですね。 ウエスタン、ELISA、フリーサイトメトリーなどでです。 もし抗体がなければ、qRTーPCRでまず確認かな。

(無題) 削除/引用 No.8026-2 - 2019/06/26 (水) 00:29:28 - おお そのmiRNAによって制御されるとわかっている遺伝子産物があればそれがポジコンとして使えます（もしそれ以外のものを調べているなら）。 >ウエスタンブロッティングでmiRNAが影響するたんぱく質のバンドの出方で判断できますでしょうか？ WBがよいと思ってます。

細胞株へのmiRNAトランスフェクションのポジコンに関して 削除/引用 No.8026-1 - 2019/06/25 (火) 15:52:23 - だいこんおろし お世話になっております。 トランスフェクション試薬のポジティブコントロールについてです。 現在、ヒト腫瘍細胞にmiRNAをトランスフェクションし機能解析を行っております。しかしながら、ネガティブコントロールと同じ結果しか出ません。今後はmiRNA濃度を上げようと考えております。そこで質問なのですが ・ポジコンの設定は具体的にどのような方法でしょうか。siRNA導入し内在コントロール（GAPDHなど）の発現が出ないということでしょうか？ ・ウエスタンブロッティングでmiRNAが影響するたんぱく質のバンドの出方で判断できますでしょうか？ ・サーモフィッシャーさんの製品でBLOCK-iT Fluorescent Oligoは蛍光でモニターできるようですが皆さんお使いになられたことはありますでしょうか？ 実験始めたばかりで申し訳ございませんが宜しくお願い致します。」

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