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レンチウィルス、Caで行くかPEIで行くか トピック削除
No.8028-TOPIC - 2019/06/26 (水) 08:27:41 - ashl
レンチウィルスベクターをHEK293Tで生産する際、プラスミドをリン酸カルシウム法でトランスフェクションするほうが一般的なように見えるのですが、PEIだとあまり生成量が良くなかったりするのでしょうか?
リン酸カルシウム法はやったことがないし、ツール類の調整も面倒くさいので、PEIでもよく生産されるのであればPEIでやっちゃいたいと思っているのですが。
 
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No.8028-5 - 2019/06/26 (水) 17:17:26 - ashl
情報ありがとうございます。
とりあえずPEIで試してみます。

(無題) 削除/引用
No.8028-4 - 2019/06/26 (水) 11:13:38 - asan
PEIの方が調整が楽、他人が同じように再現しやすい。
毒性は比較的強め。

リン酸Caは好きな人は好きだけど、pH調整とか結構シビアで雑にやると効率が悪いという人がいる。
毒性はPEIに比べて低い。

リポフェクション試薬になれた人だとPEIの方が方法がほぼ同じ操作でできるので楽と感じやすい。
金のないラボだと、PEIを最初に買う必要があるのでボスを説得したりするのが面倒。

ぶっちゃけどちらでも好きにしたらいいと思う。
ランニングコストは多分総合的に見ると同じぐらいでしょう。
15 cm dishにPEI maxでパッケージングしても、コスト的には一回あたり10円以下だと思います。

(無題) 削除/引用
No.8028-3 - 2019/06/26 (水) 09:31:29 - おお
リン酸カルシウムでざざっとやってます

>リン酸カルシウム法はやったことがないし、ツール類の調整も面倒くさい
キット(出来合いの溶液)は探せば売っていると思いますが。

両方のプロトコールが出回っているということは両方実用に耐えうるものだと思います。リン酸カルシウム法はHEKなどに対して非常に強い発現ができる方法で高タイターが期待できると一般に言われてますがどの程度違いが出るものか比べたことはありません。
過去にもその件で議論があったと思います。

(無題) 削除/引用
No.8028-2 - 2019/06/26 (水) 09:03:25 - あかね
私はPEIでぺぺいっとやってます。

レンチウィルス、Caで行くかPEIで行くか 削除/引用
No.8028-1 - 2019/06/26 (水) 08:27:41 - ashl
レンチウィルスベクターをHEK293Tで生産する際、プラスミドをリン酸カルシウム法でトランスフェクションするほうが一般的なように見えるのですが、PEIだとあまり生成量が良くなかったりするのでしょうか?
リン酸カルシウム法はやったことがないし、ツール類の調整も面倒くさいので、PEIでもよく生産されるのであればPEIでやっちゃいたいと思っているのですが。

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