Bio Technical フォーラム

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DNA定量に用いる細胞溶解液について トピック削除
No.8043-TOPIC - 2019/07/02 (火) 15:12:38 - kk
DNA定量を行う際の細胞溶解液についてお伺いしたいです。

DNA定量によって細胞数を補正したいと考えています。
調べてみると、クエン酸緩衝液に溶かしたSDSを用いて細胞を溶解させ、ヘキストの蛍光によって定量する方法を目にしたのですが、これは必ずしも緩衝液に溶解したSDSである必要があるのでしょうか。
また、できればNaOHを用いて溶解させたいと考えているのですが、可能なのでしょうか。

定量さえできれば構わないので、DNAの安定性等についてはあまり考えておりません。

何かご存じの方いらっしゃいましたら、よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.8043-3 - 2019/07/02 (火) 15:44:30 - kk
>AP様

Hoechstはらせん構造にインターカレートすることで染色するのですね。
そこの染色原理について理解できていませんでした…

ありがとうございます!!

(無題) 削除/引用
No.8043-2 - 2019/07/02 (火) 15:30:45 - AP
えっ、だってHoechstはDNAが二重らせん構造をとっていないと染まらんのでは? 細胞をアルカリ溶解したら一本鎖に解離するでしょう?

DNA定量に用いる細胞溶解液について 削除/引用
No.8043-1 - 2019/07/02 (火) 15:12:38 - kk
DNA定量を行う際の細胞溶解液についてお伺いしたいです。

DNA定量によって細胞数を補正したいと考えています。
調べてみると、クエン酸緩衝液に溶かしたSDSを用いて細胞を溶解させ、ヘキストの蛍光によって定量する方法を目にしたのですが、これは必ずしも緩衝液に溶解したSDSである必要があるのでしょうか。
また、できればNaOHを用いて溶解させたいと考えているのですが、可能なのでしょうか。

定量さえできれば構わないので、DNAの安定性等についてはあまり考えておりません。

何かご存じの方いらっしゃいましたら、よろしくお願いいたします。

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