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SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix トピック削除
No.8146-TOPIC - 2019/08/09 (金) 07:18:31 - 加藤
SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermixで得られたqPCRの最終プロダクトをクローニングしたいのですが、これってAが末端に付けちゃうタイプのポリメラーゼでしょうか?Taqはつけますよね。
 
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(無題) 削除/引用
No.8146-3 - 2019/08/09 (金) 09:38:36 - おお
Pfuなどの末端が平滑になる酵素でPCRプロダクトの一部をとって同じプライマーで10サイクルぐらい回せば。
サイクル回さなくてもPCRプロダクトとdNTPとそういう酵素で何分か72度でIncubateすれば平滑になるけど。
後者なら一旦Taq(と思われるもの)を除きたいから精製をかまさないといけない。


何れにせよ念の為にやっとけば。

(無題) 削除/引用
No.8146-2 - 2019/08/09 (金) 07:19:51 - 加藤
hot-start iTaq DNA Polymeraseと書かれてあるので、Aが付加されるとは思うのですが、この時に平滑化処理は如何様にするものでしょうか...?

SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix 削除/引用
No.8146-1 - 2019/08/09 (金) 07:18:31 - 加藤
SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermixで得られたqPCRの最終プロダクトをクローニングしたいのですが、これってAが末端に付けちゃうタイプのポリメラーゼでしょうか?Taqはつけますよね。

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