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ガラス製の三角フラスコと細胞培養が可能か トピック削除
No.8187-TOPIC - 2019/08/24 (土) 10:21:25 - CHO
いつも勉強させていただいております。
CHO細胞をオービタルシェーカーで回しながら培養したいのですが、
滅菌済のディスポ三角フラスコが高価で悩んでいます。
そこで大腸菌の時のように、
新しいガラス製の三角フラスコにシリコ栓をしてオートクレーブし、
使いまわせないかな、と思いついたのですが、
どなたか試されたことがある方はいらっしゃいませんか。
うまくいくでしょうか。。
よろしくお願いいたします。
 
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No.8187-5 - 2019/08/27 (火) 00:32:36 - おお
ある程度の量の浮遊系の培養ではこういうのも売ってますね。ガラス製のものは毎回滅菌して使かえます。内側の表面はシリコナイズされているかなど詳しいことは知りませんが、しているものもあるかなぁと思うのでカタログなどで確認するといいかと。

https://www.google.com/search?client=firefox-b-1-d&channel=tus&tbm=isch&q=spinner+flask&chips=q:spinner+flask,g_1:cell+culture:rThb7A5m01s%3D&usg=AI4_-kRtBHjrh48Z5EfdVwKyzLDApsMhEw&sa=X&ved=0ahUKEwi_nJDw7KDkAhXNop4KHXVgBWMQ4lYILSgB&biw=1049&bih=515&dpr=1

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No.8187-4 - 2019/08/25 (日) 10:47:05 - CHO
ご返信ありがとうございます。
Sigmacoteを使えばガラスでも大丈夫と聞き安心しました。
またAtsさんのディスポを再利用する裏技も大変有益な情報でした。
組換えタンパクを発現させまくるのが目的ですので、
その効率を考慮してどちらも試してみます。
助かりました。
ありがとうございました。

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No.8187-3 - 2019/08/24 (土) 14:25:04 - Ats
コーニング社のフィルターキャップ付きディスポ三角フラスコ(ポリカーボネート製)を使い回しています。
ガラス製なら200℃の乾熱滅菌で残留有機物(洗剤やエンドトキシンを含む)を分解出来ます。
しかし、プラスチック(PC)製だと無理なので、MilliQ水を目一杯いれて(フタは緩めて)オートクレーブ、水を捨てて再度(フタは緩めて)滅菌のためにオートクレーブして使用しています。フィルターキャップも含めて10回以上再利用しています。とりあえずCHO-S細胞、293-F細胞なら新品と遜色なく増殖しますし、遺伝子導入効率も落ちないようです。もっとも「ここぞ」という実験(凍結保存用の細胞を増やす時とか)では新品を使っています。
可能であればエンドトキシン混入を少しでも減らすために、つけ置き洗剤の容器も大腸菌用と分けた方が安心です。
なお、メーカー推奨ではありませんので疑いの目をもってお試しください。

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No.8187-2 - 2019/08/24 (土) 10:33:53 - おお
というか、昔はガラスで培養してましたから。
浮遊させたり、なにかキャリアーにつけたりして培養するのだと思いますが、ただガラスの表面は負電荷を帯びていて接着性がありますから、細胞によってはくっついてしまうかもしれません。表面をシリコナイズしておけばたいてい大丈夫です。

ガラス製の三角フラスコと細胞培養が可能か 削除/引用
No.8187-1 - 2019/08/24 (土) 10:21:25 - CHO
いつも勉強させていただいております。
CHO細胞をオービタルシェーカーで回しながら培養したいのですが、
滅菌済のディスポ三角フラスコが高価で悩んでいます。
そこで大腸菌の時のように、
新しいガラス製の三角フラスコにシリコ栓をしてオートクレーブし、
使いまわせないかな、と思いついたのですが、
どなたか試されたことがある方はいらっしゃいませんか。
うまくいくでしょうか。。
よろしくお願いいたします。

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