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(無題) 削除/引用 No.8193-5 - 2019/08/27 (火) 05:40:46 - MSC AAさん、ありがとうございます。 確かにコンディション培地の場合はその方が良さそうですね。 betaさん、おおさん、ありがとうございます。 はい、浮遊系の細胞になります。 やはりそうでしたか...この方法ですでに5回ほど行なっており、もうボスはこの実験に見切りをつけようとしています。 自分は継ぎ足しばかりしていましたので、私の方法が間違っていたのだと理解できました。 ボスに正直に話し、もう少し実験させてもらえるようにお話しします。 ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.8193-4 - 2019/08/26 (月) 23:21:04 - おお その細胞の扱いに関して細かいことはわかりませんが、通常Freshな培地に交換すると書かれていたら、培地を全部除いてから新しい培地を加えると私は解釈します。更に培地を加えたり、半分捨ててその分新しい培地を加えるというようなものではちゃんとその事を記述するものだと思ってます。

(無題) 削除/引用 No.8193-3 - 2019/08/26 (月) 22:08:29 - β まず、これは浮遊系細胞という理解でOKですか。 その前提でいうと、論文の記載の通りなら、遠心して細胞を集めて、古い培地を除き、新しい培地に再懸濁してDishへ、という標準的なやり方だと思います。培地を半分だけ除いて入れ替える場合などは、そのように書くと思うので。 論文には書いていない重要なこともしばしばあります。著者に直接メールしてどんな風にしたのか、うまくいかないけどそうしたものか、など聞いてみるのが一番確実です。

(無題) 削除/引用 No.8193-2 - 2019/08/26 (月) 19:09:12 - AA 分化培養の話ではないので参考程度ですが、 conditioning mediumなどで培地を全交換したくないときには、 半分を捨てて等量のフレッシュな培地を入れるようにしています。

培地交換の仕方 削除/引用 No.8193-1 - 2019/08/26 (月) 01:36:56 - MSC 素朴な疑問ですが、教えてください。 胎児肝からとある細胞をサイトカインを用いて分化誘導したいです。 ただ、先行論文にあるようにday5でとてもその細胞が20％になっているようには思えません。 そこで私の手技を疑っています。 私はまずday0で胎生期E14.5のマウス肝を取り、シングルセルにしたのち、21mlの培地にサスペンドさせ、各10cmディッシュに7mlずつプレートしました。 その後、2日置きに培地をフレッシュなものにするとありました。 私はこれを新しい培地（サイトカインは1.5倍量加えています）4mlを各ディッシュに追加する、とばかり思っていました。やはりこういった方法ではなく、きちんと全培地を遠心し、上清を捨てたのち、新しい培地を加えた方がいいのでしょうか？ みなさんはどうされていますか？

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