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(無題) 削除/引用 No.8224-8 - 2019/09/06 (金) 09:12:05 - T 先輩からApEの使い方を習えばよいですよ。

(無題) 削除/引用 No.8224-7 - 2019/09/05 (木) 16:15:56 - 学生君3号 リバースを相補鎖にするのを失念していました。 教えてくださった皆様。ありがとうございますm(_ _)m

(無題) 削除/引用 No.8224-6 - 2019/09/05 (木) 15:59:50 - おお CDSの一番最初からの塩基配列をコピーしたらいいだけの話。リバースはストップコドンから内側に。ただし相補鎖の配列になるし３’と５’の方向もちゃんと意識しないといけない。

(無題) 削除/引用 No.8224-5 - 2019/09/05 (木) 15:58:28 - ちき 何らかのソフトウェアを使わないとPCRのプライマーは設計できないものだ(自分で勝手に決めてはいけないものだ)と思い込んでいる初学者は割と多いみたいで、いつも不思議に思っています。

(無題) 削除/引用 No.8224-4 - 2019/09/05 (木) 15:44:14 - TS なので、例えばATGから25bpくらい選んだものがフォーワードプライマー、 ストップコドンから前向きに25bpくらい選んで、Reverse-complementにしたのがリバースプライマーになりますよね。 なんでBlast使いたいんですか？ 他に、スティッキーエンドを付けたり、フレームを合わせる必要があったりするのは、手作業でやるのが普通と思います。 さすがに周りの先輩や先生に聞いたほうが良いですよ。

(無題) 削除/引用 No.8224-3 - 2019/09/05 (木) 15:35:49 - 学生君3号 大腸菌に導入してタンパク質を増やしたいので、 インサートをつくるためにPCRをしたいと考えています。

(無題) 削除/引用 No.8224-2 - 2019/09/05 (木) 15:30:59 - TS 場所が決まっているなら、Blastで設計する必要あります？

プライマーの設計について 削除/引用 No.8224-1 - 2019/09/05 (木) 15:15:41 - 学生君3号 BLASTを用いてプライマーを設計しているものです。 プライマー設計時に、CDSの一番最初からフォワードプライマー、最後にリバースプライマーがくるように設定したいのですが、うまくいきません。 プライマーの位置を決めるような場所があり、そこに希望の番号を入力しても全然違う場所にプライマーができてしまいます。 CDS部分をプライマーで頭から最後まではさめるやり方、御存知でしたら是非教えてくださいm(_ _)m。

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