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(無題) 削除/引用 No.8271-8 - 2019/09/26 (木) 12:35:55 - ちき 市販の酵素の中では、λPPは-80°Cじゃないとすぐ失活する(データシートにもそうあるし、経験としても)。

(無題) 削除/引用 No.8271-7 - 2019/09/26 (木) 10:47:00 - mon ＞おそらく昔からの慣習でぼんやり決まってきたものと推察します 違うと思いますよ、先人の数多くの経験からでしょう。 ただし-20℃、-80℃という温度設定は機械的制約（フリーザーの性能）でしょう。 ４℃（氷冷）は不安定で、冷凍庫(-10~-20℃）ができて-80℃の製品が出来たので試したところ、というところではないでしょうか。 凍結融解での不安定化（不活性化）は、水和状態の破壊・氷の結晶がタンパク（複合体）の構造を破壊するという物理的現象が原因でしょう。

(無題) 削除/引用 No.8271-6 - 2019/09/26 (木) 08:46:54 - 独り言 一般的にイメージとして、−20度以下で凍っていたら、分子が全くうごかないと思っているのかもしれませんが、 化学的には、−２０度でも分子はまだまだ動いているということです。 凍っているのはH2Oであって、すべての化学的結合が１００％起こらないという保証なんてありません。 長期的に見ればー８０度でも１００％安心ということはないでしょう。 可能であれ１５０度とか、液体窒素がより安定ですが、現実的には経済的にむずかしいですよね。 タンパク質によってはもちろん、−８０度である必要はないと思います。−２０度でもよいと思います。 実際に、多くの制限酵素などはー２０度保存ですよね。 ただ、扱っているタンパク質がどのくらい不安定なのかわからないので、ファーストチョイスとしてー８０度ぐらいに保存できれば、損はないということです。

(無題) 削除/引用 No.8271-5 - 2019/09/26 (木) 08:32:34 - プロテイン Km様 ご回答ありがとうございます。 仰る通りメーカー側の検証期間に依存しているのでしょうね。 一方で凍結融解がなければ２年程度まで安定という文献を見つけました。 凍結温度帯（マイナス温度帯）に関する検証論文を発見することができていません。 おそらく昔からの慣習でぼんやり決まってきたものと推察しますが、その根拠論文があればすっきりするのですが。。

(無題) 削除/引用 No.8271-4 - 2019/09/26 (木) 08:28:18 - プロテイン 独り言様 回答ありがとうございます。 立体構造を保つためにはマイナス80度とありますが、この理由は何なのでしょうか？ 凍結融解が劣化の主要因だとするとそこまで低温でなくても安定にも思えるのですが。

(無題) 削除/引用 No.8271-3 - 2019/09/25 (水) 21:43:58 - Km 何もこの領域に限らないですが、保存期間とは、メーカー側のデータに基づいてそこまでは保証するということではないでしょうか。つまりそれ以上の期間の保存は検証していないので、何か起きても保証できないという感じで。

(無題) 削除/引用 No.8271-2 - 2019/09/25 (水) 20:38:33 - 独り言 タンパク質によるとしか言えませんが、基本的には立体構造を保つためにはー80度保存です。 なんとなくー80度なら数年以上平気だと思います。自分で精製したタンパク質はそうやって何年も眠っています。もちろん活性が下っている可能性はあるのかもしれませんが。 保存期間が一年というのは、目安みたいなものだと思います（もしかするとすごく不安定なタンパク質かもしれませんが）。一年経つと、いきなり活性がなくなるなんてことはないです。それよりも凍結再融解とかのほうが活性をさげるかもしれません。

タンパク質の保存期間 削除/引用 No.8271-1 - 2019/09/25 (水) 15:27:16 - プロテイン 最近購入した培地が冷凍で届きました。 成長因子を含むために冷凍とのことでしたが、保存期間は1年以内とあります。 タンパク成分を凍結保存した場合に、期間によって劣化していく要因は何なのでしょうか？また温度帯（-20、-40、-70）によっても劣化の進行は変わってくるのでしょうか？具体的な論文等でも構いませんのでご教授いただけると幸いです。

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