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ハイドロゲルコートされたディッシュからのRNAの回収に関して トピック削除
No.8290-TOPIC - 2019/10/02 (水) 23:40:58 - C.C.
ハイドロゲルコートされたディッシュからのRNAおよびタンパク質の回収に関してお聞きしたいです。

この度、ハイドロゲルコートされたディッシュにまいた細胞からRNAおよびタンパク質を回収しようと試みています。

ただ、予備実験を行ったところ、ハイドロゲルが想像以上にDMEMを吸い込むようで、ディッシュに直接Lysis Bufferを入れても余計な水分が多くなってしまい上手く細胞溶解液を手に入れられません。

やはり細胞をディッシュからはがしてペレットダウンするしかないのでしょうか?
RNAに関しては特に、ディッシュからはがす刺激を入れたくないので、出来るなら何か別の方法で回収したいと思っています。

もし何かご存じであれば教えていただければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.8290-2 - 2019/10/03 (木) 01:18:55 - おお
RNAは出てくる水分量を見越して多めにLysis bufferを加えれば大丈夫とおもいます。蛋白はどうでしょうね、、、2xLysis bufferでも加えますか、、、ただ培地の血清が除けないならBSAなど余分な蛋白が大量にまじりますね。。。

ハイドロゲルコートされたディッシュからのRNAの回収に関して 削除/引用
No.8290-1 - 2019/10/02 (水) 23:40:58 - C.C.
ハイドロゲルコートされたディッシュからのRNAおよびタンパク質の回収に関してお聞きしたいです。

この度、ハイドロゲルコートされたディッシュにまいた細胞からRNAおよびタンパク質を回収しようと試みています。

ただ、予備実験を行ったところ、ハイドロゲルが想像以上にDMEMを吸い込むようで、ディッシュに直接Lysis Bufferを入れても余計な水分が多くなってしまい上手く細胞溶解液を手に入れられません。

やはり細胞をディッシュからはがしてペレットダウンするしかないのでしょうか?
RNAに関しては特に、ディッシュからはがす刺激を入れたくないので、出来るなら何か別の方法で回収したいと思っています。

もし何かご存じであれば教えていただければ幸いです。

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