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(無題) 削除/引用 No.8428-6 - 2019/11/20 (水) 11:27:57 - moz 例えば、 “Conditional Immortalization of Freshly Isolated Human Mammary Fibroblasts and Endothelial Cells.” doi:10.1073/pnas.98.2.646.

(無題) 削除/引用 No.8428-5 - 2019/11/20 (水) 10:51:58 - moz >6ウェルから2コロニーしか不死化セルができませんでした。 不死化に成功しているのでは？ 細胞集団の中のごく一部の細胞に追加の変異がすでにあって（生じた？）hTERTで顕在化したのだと思います。 「他の線維芽細胞」が何か不明ですが、野生の動物由来ですか？実験用マウス由来なら高頻度で不死化するそうです。asanさんの指摘していますが、野生動物由来の線維芽細胞は、いわゆる癌抑制遺伝子（経路）が強力でなかなか不死化しません（だから癌にもなりにくい）。

(無題) 削除/引用 No.8428-4 - 2019/11/20 (水) 09:52:58 - asan 細胞によると思います。よりprimaryに近い細胞ほど、セネセンスを回避するためにさらなる変異が必要な可能性はあります。 線維芽細胞はSV40LTとか入れると綺麗に不死化しますが、形も若干変わります。おそらくp57, RBあたりの制御がintactだとよろしくないのでは？

(無題) 削除/引用 No.8428-3 - 2019/11/20 (水) 09:43:37 - ぽん他 mozさん、ありがとうございます！ ですが、私はこれまでにも他の線維芽細胞では不死化に成功してきましたし、ウイルスを販売する会社も線維芽細胞の不死化に使用とうたっています。 それにもかかわらず私が2コロニーしか得られなかったのはmozさんが言われるように、何かしらの追加の遺伝子変異を持ったものがhTERTに触発され不死化した、selection説ということでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.8428-2 - 2019/11/20 (水) 09:36:14 - moz hTERT発現だけでは不死化しません。 何かしらの追加の遺伝子変異が必要です。

hTRETの発現は不死化に十分ですか？ 削除/引用 No.8428-1 - 2019/11/20 (水) 04:17:00 - ぽん他 ヒト線維芽細胞を購入し、自作のhTERTをレンチで発現させ、不死化をしてきましたが、ウイルスが売られてるとのことで、それを使ってみたところ、6ウェルから2コロニーしか不死化セルができませんでした。 ウイルスタイターは保証済みです。 可能性としては感染しても大部分は不死化しない、もしくは感染効率が低かった、だと思います。ただタイター保証済みなので、可能性は前者かな？と思いますが、そんなことってありえますか？

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