Bio Technical フォーラム

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癌細胞に関するmicroRNAの作用 トピック削除
No.8459-TOPIC - 2019/11/30 (土) 00:29:36 - ここ
宜しくお願いします。癌細胞で特定のmicroRNAは、遺伝子発現を抑えることで細胞浸潤など機能面で促進もしくは抑制すると考えております。現在行っている実験で、あるmicroRNAを細胞株にトランスフェクションしました。ターゲットと思われるたんぱく質のウエスタンブロッティングを行った所、バンドが濃くでており、ターゲットの3'UTRの配列を組み込んだルシフェラーゼレポーターベクターとmiRを細胞にコトランスフェクションし、ルシフェラーゼレポーターアッセイを行ないましたが、数値が高くなりました。私の考えるところによると、microRNAの働きからどちらも抑制されるはずだと思うのですが、microRNAがタンパク質の発現を増幅することなどはあるのでしょうか?知識不足で申し訳ありませんがご教示頂ければと思います。
 
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(無題) 削除/引用
No.8459-2 - 2019/11/30 (土) 06:35:30 - s
host mRNAでの安定性の増強などの作用があるかどうかは知らないのですが、miRNAがvirus genomeの安定性を向上させる現象は、ウイルスでは多く見られる現象です。

代表的なものがHCVです。

癌細胞に関するmicroRNAの作用 削除/引用
No.8459-1 - 2019/11/30 (土) 00:29:36 - ここ
宜しくお願いします。癌細胞で特定のmicroRNAは、遺伝子発現を抑えることで細胞浸潤など機能面で促進もしくは抑制すると考えております。現在行っている実験で、あるmicroRNAを細胞株にトランスフェクションしました。ターゲットと思われるたんぱく質のウエスタンブロッティングを行った所、バンドが濃くでており、ターゲットの3'UTRの配列を組み込んだルシフェラーゼレポーターベクターとmiRを細胞にコトランスフェクションし、ルシフェラーゼレポーターアッセイを行ないましたが、数値が高くなりました。私の考えるところによると、microRNAの働きからどちらも抑制されるはずだと思うのですが、microRNAがタンパク質の発現を増幅することなどはあるのでしょうか?知識不足で申し訳ありませんがご教示頂ければと思います。

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