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RNAプローブのラベル効率について トピック削除
No.8470-TOPIC - 2019/12/04 (水) 13:39:59 - 井上 咲良

RNAプローブのラベル効率について質問です。

in situ hybridizationでDIGラベルしたRNAプローブを使っています。

新しく作ったプローブのラベル効率をチェックしたところラベル効率がよくありませんでした。
ラベリング効率をあげる方法をご存知の方がいらっしゃいましたら教えていただきたいです。
使っているのはRocheのDIG RNAラベリングキット(T7/SP6)です。
 
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(無題) 削除/引用
No.8470-4 - 2019/12/04 (水) 14:37:48 - AA
ラベル効率は何で見たのでしょうか?

DIGで標識されているのはUTPなので、Aの少ない鋳型配列なら必然的に標識効率は低下します。

単に転写産物ができない、ということであれば、鋳型の用意をミスってないか確認されると良いと思います

(無題) 削除/引用
No.8470-3 - 2019/12/04 (水) 14:27:26 - 井上+咲良
>[Re:2] seventhさんは書きました :
> 何と比較して効率が下がっているとしているんでしょうか?
> 見ているのはラベル効率ですか?ハイブリダイズまでやった結果ですか?


キットに入っているコントロールRNAです。

ラベル効率のみを見ました。
ハイブリダイズはまだやっていません。

(無題) 削除/引用
No.8470-2 - 2019/12/04 (水) 14:07:30 - seventh
何と比較して効率が下がっているとしているんでしょうか?
見ているのはラベル効率ですか?ハイブリダイズまでやった結果ですか?

RNAプローブのラベル効率について 削除/引用
No.8470-1 - 2019/12/04 (水) 13:39:59 - 井上 咲良

RNAプローブのラベル効率について質問です。

in situ hybridizationでDIGラベルしたRNAプローブを使っています。

新しく作ったプローブのラベル効率をチェックしたところラベル効率がよくありませんでした。
ラベリング効率をあげる方法をご存知の方がいらっしゃいましたら教えていただきたいです。
使っているのはRocheのDIG RNAラベリングキット(T7/SP6)です。

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