Bio Technical フォーラム

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吸光度測定 ウェルの端側 トピック削除
No.8495-TOPIC - 2019/12/14 (土) 15:19:41 - heiughu

試薬(CCK-8,MTT)によって生細胞率をカウントしています.
CCK-8,MTTそれぞれ吸光度によって測定を行うと思いますが,吸光度を測定する際に,ウェルプレートの端側に行くほど吸光度が低下している気がします.96ウェルプレートと24ウェルプレートで実験を行っていますが,24ウェルは特にその影響が受けやすい気がします.

装置の問題ではないでしょうから,何か別の問題があるものと思いますが,全く思いつきません.

どなたか思い当たることがあれば教えていただきたいです.

それとも,ウェルの端は使わないというのが基本なのでしょうか.
(24ウェルであれば,中央の16個,あるいはさらに小さく4つとか)

宜しくお願い致します.
 
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(無題) 削除/引用
No.8495-3 - 2019/12/14 (土) 22:41:32 - ちき
絶対値はともかく、吸光度の相対値を較正できる材料は全て手元にあるはずなのに、何を聞きたいんだろう。少しきつい言い方かもしれませんが、そう思います。

(無題) 削除/引用
No.8495-2 - 2019/12/14 (土) 17:21:50 - oo
96ウェルは端の列(縦横)は内側より早く乾燥するので(CO2 Incubator内でも)細胞の増殖に影響を受けやすく避ける人はまあまあいると思います。この場合端には滅菌水、PBS、または培地などを入れておきます。

24Wellはそれほどではないと思いますが、4隅だけPBSをいれて使わないという人はいます。まあ気になるなら48Wellで端を使わないとかでもいいのかもしれません。

>装置の問題ではないでしょうから

各社のプレートのレイアウトがインプットされていて、微妙な位置の違いを補正しているプレートリーダーもあるようなので説明書を一度確認してください。

吸光度測定 ウェルの端側 削除/引用
No.8495-1 - 2019/12/14 (土) 15:19:41 - heiughu

試薬(CCK-8,MTT)によって生細胞率をカウントしています.
CCK-8,MTTそれぞれ吸光度によって測定を行うと思いますが,吸光度を測定する際に,ウェルプレートの端側に行くほど吸光度が低下している気がします.96ウェルプレートと24ウェルプレートで実験を行っていますが,24ウェルは特にその影響が受けやすい気がします.

装置の問題ではないでしょうから,何か別の問題があるものと思いますが,全く思いつきません.

どなたか思い当たることがあれば教えていただきたいです.

それとも,ウェルの端は使わないというのが基本なのでしょうか.
(24ウェルであれば,中央の16個,あるいはさらに小さく4つとか)

宜しくお願い致します.

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