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(無題) 削除/引用 No.8788-4 - 2020/04/27 (月) 21:13:05 - 5 細胞外小胞みたいな形で膜に包まれて、あるいは膜にくっついて細胞から放出されてるのではないかと。 エクソソームとかの研究も参考にして培養上清を密度勾配遠心とかで分画してみたらどうよ。どういったものと一緒にいるかわかれば色々情報引き出せると思う。

(無題) 削除/引用 No.8788-3 - 2020/04/22 (水) 13:24:57 - toto たとえばＧＦＰも細胞質から細胞外にunconventional pathで出ますが、有名なところでは、UPS19の経路があります。 www.nature.com/articles/ncb3372

(無題) 削除/引用 No.8788-2 - 2020/04/22 (水) 11:09:19 - あの 遺伝子導入後の細胞死はあり得るかと。 LDHの放出などで補正してもそれでも高いですが？

非分泌型タンパク質強制発現系での細胞外漏出について 削除/引用 No.8788-1 - 2020/04/22 (水) 11:02:14 - ちゅむたち ご高覧いただきましてありがとうございます。 表題の件につきまして、例えばシグナルペプチドを除いた非分泌型のnLuc(19kDa)を過剰に発現させたとき、培養上清に細胞画分の数倍程強い発光が見られてしまいます。 こういった現象は強制発現系ではよく観察されるものであると存じますが、この非分泌型タンパク質の細胞外分泌はどのような分泌経路で起こりうるのでしょうか。 多種多様なタンパク質がUnconventional protein secretionのように細胞膜を通過するとは考えられにくいと思いますし、細胞のネクローシスやExtracellular particlesの破裂にしてはその発光量があまりにも多すぎると思います(上記nLucの場合EVs画分の発光は低いです)。 何かご存じの方がいらっしゃいましたら、ぜひご教示いただけましたら幸いです。 どうぞよろしくお願いいたします。

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