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(無題) 削除/引用 No.8811-4 - 2020/05/01 (金) 18:18:11 - み 免疫沈降時のBuffer組成に問題ないかい？ Beadsが悪いのかサンタクルーズのFLAG抗体が水なのか区別できるかい？ FLAG抗体を直接SDS-PAGEに1ugくらい流してバンドが出るか確かめたかい？

(無題) 削除/引用 No.8811-3 - 2020/05/01 (金) 16:09:59 - 5 たまたま悪いロットを買ってしまったのではないでしょうか。他社でも買えますし、キャンペーンなどで無償サンプルとかやってるメーカーも時々見かけるので、このメーカーにこだわらず広く検討してみれば。

(無題) 削除/引用 No.8811-2 - 2020/05/01 (金) 15:40:51 - え ありえん

Protein GビーズにmIgG1が結合しません 削除/引用 No.8811-1 - 2020/05/01 (金) 07:44:51 - ぷろたん 質問させてください。 Protein GビーズにmIgG1が結合しません 具体的にはサンタクルズ社から購入した抗FLAG抗体で免疫沈降する実験ですが、同じくサンタクルズ社から購入したProtein G-beadsを加えて4度、1時間混和しましたが、SDS-PAGE後にポンソーで膜を染めると、IgG, IgLのどちらも染まりませんでした。つまりビーズが抗体に結合していないようです。 これまでサンタクルズ社のProtein A/Gビーズで同様の実験を行なっていまして、何も問題になることはありませんでした。今回、このProtein Gビーズを用いるにあたり、mouse IgG1とのcompatibilityを4社のホームージで見た表を確認し、確固たる自信を持ってProtein Gビーズで大丈夫だろうと実験しましたが、だめでした。なぜでしょうか。

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