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WBの抗体反応の容器 トピック削除
No.8921-TOPIC - 2020/06/15 (月) 11:58:50 - WB
ウェスタンブロッティングで、ブロッキングや抗体反応を行う際に、細胞培養用のディッシュを使用しても大丈夫でしょうか?
ディスポーザブル容器として使用したいのですが、抗原抗体反応の効率に影響する可能性はありますか?
 
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No.8921-10 - 2020/06/15 (月) 15:28:04 - おお
実際に使っていた人がいました。
使えるかどうかという点では使えます。

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No.8921-9 - 2020/06/15 (月) 15:16:04 - AA
細胞培養用のディッシュだと、どんどん乾いていきそうな気がしますし、
やはり皆さんの使われているようなプラスチック容器がいいと思います。
使い回しが気になる場合は、ヒートシール可能なハイブリバッグなどでしょうか。
液量を十分に使える洗いの段階なら秤量用のプラディッシュを使い回すのがおすすめです

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No.8921-8 - 2020/06/15 (月) 15:13:54 - WB
みなさま、アドバイスやご経験談をありがとうございました。
懸念していた、抗体反応への影響はなさそうで安心しました。
WB用として四角いプラスチックケースも所持しているのですが、無菌性が失われた細胞培養ディッシュがあり、これを何かに使えないか、と思い質問しました。
ちょっと試してみたいと思います。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.8921-7 - 2020/06/15 (月) 14:56:31 - れんちん
ブロッキング剤のタンパク質の方が圧倒的なので吸着は考えなくても良さそうですね。
私は蓋もできる安いタッパーを揃えて、その中でブロッキング、抗体反応、洗浄まで行っています。

(無題) 削除/引用
No.8921-6 - 2020/06/15 (月) 14:22:13 - G25
>コーニングのディッシュなのですが、細胞接着しやすいように表面加工されているようで、それが抗原抗体反応に影響してしまうのか気になっています。

むしろコーディングされていないすっぴんのポリスチレンのほうが、抗体の吸着を起こして実効濃度を下げる可能性があります。 ELISAの固相化がいかにして行われるかを思い出してご覧なさい。

まあ、実際にはコーディングされていようがなかろうが、抗体はブロッキング液で希釈されているのが普通で、しかもその前にブロッキングのステップで同じ容器を使っているはずですので、抗体の吸着は無視できますが。

むしろ、細胞培養用のディッシュを使うなんてもったいないというのが、一番の懸念。

(無題) 削除/引用
No.8921-5 - 2020/06/15 (月) 14:10:39 - WB
アドバイスをありがとうございます。

>>表面加工してあるタイプだと吸着するとかしないとか

そうなのです、ここが気になっていて。
コーニングのディッシュなのですが、細胞接着しやすいように表面加工されているようで、それが抗原抗体反応に影響してしまうのか気になっています。

(無題) 削除/引用
No.8921-4 - 2020/06/15 (月) 14:00:18 - G25
反応/洗浄用の容器は普通に水洗いで使いまわしてもまず問題ないと思いますが、
私は気になる場合、容器の内側を一層のサランラップでコートします。
「避難生活や野営に役立つ食器の使い方」みたいに。
秤量用にバランスディッシュを使っている研究室なら、Lサイズのディッシュなんかお手頃です。

(無題) 削除/引用
No.8921-3 - 2020/06/15 (月) 13:12:50 - 774
うちでも100均のただのタッパーでやっています。
ディッシュだと浅いのでシェーカーで振るとこぼれませんかね…?
あと表面加工してあるタイプだと吸着するとかしないとか心配するのが面倒。

(無題) 削除/引用
No.8921-2 - 2020/06/15 (月) 12:28:48 - あおい
使用経験はありませんが、おそらく大丈夫かと思います。

私の研究室では100均で購入したプラスティック製品などを使い回ししていますが、水できちんと洗っているだけで問題なく使用できています。

ディッシュは丸いのでメンブレンの角が過度にまがったりしないかどうかの懸念くらいではないでしょうか。

WBの抗体反応の容器 削除/引用
No.8921-1 - 2020/06/15 (月) 11:58:50 - WB
ウェスタンブロッティングで、ブロッキングや抗体反応を行う際に、細胞培養用のディッシュを使用しても大丈夫でしょうか?
ディスポーザブル容器として使用したいのですが、抗原抗体反応の効率に影響する可能性はありますか?

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