Bio Technical フォーラム

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[至急] TMB (Vector) の発色に関して トピック削除
No.9012-TOPIC - 2020/07/14 (火) 16:05:36 - rin
免疫染色をしています。
青色で発色させたくて、VectorのTMB Substrate Kit (SK-4400) を購入しました。
発色の感度は製品説明にある通りかなり高く、無事に発色したのですが、その後、エタノール・G-NOXで脱水・透徹しようとすると色が消えます。
(製品説明には脱水・透徹してくださいと書いてあるのですが。)

エタノールで3分3回浸すと色がほぼ消えました。
1分3回だとその時は大丈夫なのですが、封入して翌日観察すると消えてました。(これはおそらく脱水不足が原因かと思います。)
マウント剤は非水溶性のものを使用しています。

今のままでは観察できずに困っています。
誰か、TMB Substrate Kit (SK-4400)をご使用されている方がいらっしゃいましたら、どうすれば良いのか教えていただきたく存じます。
 
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(無題) 削除/引用
No.9012-2 - 2020/07/15 (水) 09:32:05 - h
70〜100%のエタノールで〜5秒とかで脱水してます

100%は気持ち長め

HEとか他の疎水系もそんな感じです

染色かごを使うんじゃなくて、1枚ずつしっかり馴染ませる感じで

キシレンもムラがなくなるまでは手でもって馴染ませてからかごに入れて置いてます

[至急] TMB (Vector) の発色に関して 削除/引用
No.9012-1 - 2020/07/14 (火) 16:05:36 - rin
免疫染色をしています。
青色で発色させたくて、VectorのTMB Substrate Kit (SK-4400) を購入しました。
発色の感度は製品説明にある通りかなり高く、無事に発色したのですが、その後、エタノール・G-NOXで脱水・透徹しようとすると色が消えます。
(製品説明には脱水・透徹してくださいと書いてあるのですが。)

エタノールで3分3回浸すと色がほぼ消えました。
1分3回だとその時は大丈夫なのですが、封入して翌日観察すると消えてました。(これはおそらく脱水不足が原因かと思います。)
マウント剤は非水溶性のものを使用しています。

今のままでは観察できずに困っています。
誰か、TMB Substrate Kit (SK-4400)をご使用されている方がいらっしゃいましたら、どうすれば良いのか教えていただきたく存じます。

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