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(無題) 削除/引用 No.904-4 - 2012/09/08 (土) 14:35:05 - おお そうですねぇ。ポジコンのことも言おうかとおもったんですが、各社販売している抗体のカタログのWBのイメージで使っているもの(HeLaとか比較的一般的なものが使われていることがおおいですが)はポジコンになると思うし、それは気がつくだろうと、、、 会社によってはサポートセンターとかある程度トラブルシューティングをやってくれるところもあるのでは?

(無題) 削除/引用 No.904-3 - 2012/09/08 (土) 09:09:33 - qq ポジコンというか、Bloc1s1が高発現する組織を使っても、うまく出ないのでしょうか？ Human protein atlasは、見てみましたか？（何かコマーシャルなHPではありますが）

(無題) 削除/引用 No.904-2 - 2012/09/07 (金) 10:18:43 - おお ECLのキットのより感度の高いやつでやってみるとか、、、 サンプルは組織でしょうか、細胞でしょうか。細胞だと各社WBのイメージを出していてあまり問題がなさそうな物もあるようですね。 各社のWBイメージで使っている抽出条件とか論文の抽出条件をしらべてみてはどうでしょうか、緩い抽出条件はフラクションをうまく取ると同じタンパク量レーンにのせてもターゲットのタンパクは多くなるわけですから。

いまBloc1s1の実験で困っています。 削除/引用 No.904-1 - 2012/09/07 (金) 03:44:11 - どなたか教えてください。 いまBiotechフォーラムをみている皆様 Bloc1s1 (Biogenesis of lysosome-related organelles complex 1 subunit 1)という蛋白質をwestern blottingでみようと思っているのですが、まったくシグナルが出ません。信頼出来る複数の会社から相応の価格の抗体を入手してやってみましたが駄目でした。並行してやっている他の蛋白質のwesternはいずれも良好な結果を得ており、blotting機器や2次抗体等は問題ではなさそうです。蛋白質の抽出もSDS bufferで直接ホモジナイズしており、可溶化不十分とか分解の可能性も低い気がします。論文を見てこの蛋白質の抗体を自作した研究室に下さいメールを出しましたが、『あまりいい抗体でなくて論文を出して以降はもう全く使っていないものですから-----』と言うお返事をいただきました。この蛋白質を扱った経験のある方いましたら、思い当たる事ありましたら情報お願いいたします。 どなたか教えてください、拝

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