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(無題) 削除/引用 No.9343-13 - 2020/12/04 (金) 00:37:44 - zcftγy７ 顕微鏡ではどんな風に見えるのかを詳細希望？規則的な構造or無色半透明の不定形? 。

(無題) 削除/引用 No.9343-12 - 2020/12/02 (水) 10:54:15 - おお >[Re:8] モモさんは書きました : > これとは別に掲示板を投稿した後に、フラスコにも白色の塊が出てきたのですが、これは、細胞の不均一さから出てきたもの？あるいは投稿されているような、トリプシン処理後に、細胞がバラバラにほどけないために、塊ができて、それがコアになって、マクロ上で、白色の細胞塊ができたものと考えています。。。。 > > ちょっと確信が持てませんが、、、 > > いずれにせよ、今のところ、フラスコにコンタミは確認できません。細胞の破片上のものがいつも以上に浮遊している印象がありますが、気のせいでしょう。。。 > > となるとコンタミはないのか、、、 自身が判断がつかないのであれば、それは願望でしかありません。コンタミした培地など使ったとしてしばらくコンタミらしきものが見当たらないとしても、かなりの確率で細胞を培養していくと、コンタミした菌が生えてきます。コンタミがなさそうでも後で手がつけられなくなることがたいていです。まあその時点で判断するからいいと言われればそれ以上言えませんけど。 あなたの状況がコンタミなのか私にはわかりませんが、なるべくちゃんとした結論がつけられるようにしたほうがいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.9343-11 - 2020/12/02 (水) 10:44:53 - み >[Re:1] モモさんは書きました : > 細胞培養中にコンタミが疑われた時、みなさんどのように対処していますか？ 捨てるでしょう。ストックがあるなら起こしなおせば良い話。もちろん培地も新調する。 細菌ではなく菌塊ってどういう意味ですか？菌塊は菌でしょ。

(無題) 削除/引用 No.9343-10 - 2020/12/02 (水) 09:17:05 - ど素人 ストックの培地内の塊について、顕微鏡所見で確定にいたらないとおっしゃいますが、そこの所見をもう少し詳しく書くか、写真を提供しないと分からない、ということを皆様がおっしゃっているような気がします。どのような所見ですか?

(無題) 削除/引用 No.9343-9 - 2020/12/02 (水) 08:19:34 - モモ 培地は今は当然新しく調整しています。

(無題) 削除/引用 No.9343-8 - 2020/12/02 (水) 08:17:10 - モモ フィブリンの塊の可能性ですか。それは考えていませんでした。 もちろんフィルターろ過したFBSを使用していますが、1か月位すると形成されることもあるんですかね？ これとは別に掲示板を投稿した後に、フラスコにも白色の塊が出てきたのですが、これは、細胞の不均一さから出てきたもの？あるいは投稿されているような、トリプシン処理後に、細胞がバラバラにほどけないために、塊ができて、それがコアになって、マクロ上で、白色の細胞塊ができたものと考えています。。。。 ちょっと確信が持てませんが、、、 いずれにせよ、今のところ、フラスコにコンタミは確認できません。細胞の破片上のものがいつも以上に浮遊している印象がありますが、気のせいでしょう。。。 となるとコンタミはないのか、、、

(無題) 削除/引用 No.9343-7 - 2020/12/02 (水) 03:41:53 - おお コメント追加します ほんというと指導している人、経験がある程度以上ある人に見てもらうのがベストだと思います。その構造物を顕微鏡で見るのが直接的で判断しやすいです。ただ、そういう相談ができる人がいないと言うなら、顕微鏡像をどこかに貼って相談する手は無きにしもあらずです。 そのアガロースゲル状のものはコンタミであるなら、カビの一種で顕微鏡でみると繊維上のものが放射状に広がっていたり、繊維状のものが絡み合ったりしているしているのが見えるかもしれません。またこのような場合繊維のふとさがほぼ一定であるなどある程度の規則性がみれます。なにか成分が凝集したものとかだとあまり規則性は認められません。

(無題) 削除/引用 No.9343-6 - 2020/12/01 (火) 22:13:19 - xcvghjui 血清入りで透明な構造物だと、もしかするとフィブリンの塊かもしれませんが、カビかもしれません。カビならばそれなりの構造を呈するので顕微鏡で見ればわかります。顕微鏡で見ても構造が観察しにくいようなものならば無生物と思います。カビは37℃では増殖がとても遅いですが、室温くらいだと割と早いです。培地を0.02μmフィルター滅菌すれば菌体自体は除去できますが、それらが産生した物質は除去できないので、コンタミがのぞけても影響は引き続き残り、結果に重大な影響を与えかねないので、通常は疑わしいならば、培地は捨てて新規に調製するものと思います。

(無題) 削除/引用 No.9343-5 - 2020/12/01 (火) 09:35:02 - あおい たぶんカビじゃないでしょうか。 わたしのところも以前１ヶ月くらい培地をいれっぱなしにしてると生えてきました。白くてもやもやしているのが浮かんでいる感じです。 そもそもエアコンなどが古くて汚いのでその影響じゃないかと考えて、２週に１度インキュベーター内を軽く清掃したりしています。 コンタミ細胞を使用しつづけるのはおすすめしません

(無題) 削除/引用 No.9343-4 - 2020/11/30 (月) 13:01:07 - 774 除けたとしても、低栄養負荷等により変質している可能性を捨てきれないので捨てます。 コンタミから回復させた細胞で出た結果を汚染のない細胞が再現しなかったらコンタミさせてみますか?ってことになる。

(無題) 削除/引用 No.9343-3 - 2020/11/30 (月) 12:08:24 - ど素人 ふつうは捨てます。 その細胞がなくなったら死ぬしかないくらい掛け替えのないものなら、抗真菌薬を用いる場合があると聞いたような気もします。

(無題) 削除/引用 No.9343-2 - 2020/11/29 (日) 20:07:35 - おお コンタミはそうかんたんにのぞけません。コンタミしている可能性があるものは処分して、細胞も起こし直すほうがいいです。

細胞培養中にコンタミが疑われた時の対処 削除/引用 No.9343-1 - 2020/11/29 (日) 13:23:09 - モモ 細胞培養中にコンタミが疑われた時、みなさんどのように対処していますか？ モヤっとした白色から透明の浮遊物がストックの培地に見られまして、アガーの塊のような形態ですが、明らかにけば立った形状をしているわけでもないです。 現段階では、細菌ではなく、菌塊かなと思っているのですが、倒立顕微鏡で観察しても（染色まではしていません）何か確定に至らないのですが、普通に考えてコンタミを疑っています。 明確に、フラスコに菌塊があるわけではないのですが、培地がコンタミしているとするならば、フラスコにも混入しているはずです。 増殖スピードは速い印象はないのですが、PBSで入念に洗浄して、新しい培地で継代を繰り返せば、消失するものなのでしょうか？

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