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グリコーゲン量の測定 トピック削除
No.9428-TOPIC - 2021/01/13 (水) 20:04:01 - bdbd
マウス肝臓のグリコーゲン測定を行う場合、凍結後破砕した組織でも測定可能ですか?また、ライセートと測定キットを使って測定された方がいらっしゃいましたら、うまくいくコツなど教えて頂けないでしょうか。
 
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No.9428-6 - 2021/01/14 (木) 11:28:19 - bdbd
コメントありがとうございます!
キットはシグマ社のものです。
実は、凍結した肝臓を、溶解するバッファーに規定量ぶんだけメスで切って溶解するのか、破砕したものを溶解するのか、とった葉をまるごとバッファに溶解して、規定量ぶんのバッファを使用すればいいのか、よく分からなくなってしまいました。
タンパク抽出用に破砕したものは既にあるのですが、正確に計量するのが難しいです。
タンパク量で揃えたライセートを使って比較することも考えたのですが、組織ライセートを用いて測定した論文が見当たりません。。
ライセートでも測定可能なようなのですが。。

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No.9428-5 - 2021/01/14 (木) 08:11:25 - qq
学生実習だったりして、キットを使わないのではないかな?
昔、広島の某私立大学では冷凍「カキ」のグリコーゲンを測定していたように記憶しています。

(無題) 削除/引用
No.9428-4 - 2021/01/14 (木) 02:30:40 - おお
https://fnkprddata.blob.core.windows.net/domestic/data/datasheet/ABN/KA0861.pdf

Glycogen can be metabolized very rapidly in some tissues after death (within a minute), therefore, special cares must be taken to minimize glycogen consumption when take tissue sample, such as, frozen samples immediately, keep cold while working.

https://www.caymanchem.com/pdfs/700480.pdf

Weigh the frozen tissue and then mince into small pieces

キットの説明ちゃんとよんだかなー

(無題) 削除/引用
No.9428-3 - 2021/01/14 (木) 00:21:17 - おお
あ、そうそうどのキットを使うのかも開示したほうがいいんじゃないかな。

(無題) 削除/引用
No.9428-2 - 2021/01/14 (木) 00:08:03 - おお
>凍結後破砕した組織でも測定可能

フレッシュな肝臓で測定するのと差があるかという質問ですか?やってみればわかるような気もしますが、、、

グリコーゲン量の測定 削除/引用
No.9428-1 - 2021/01/13 (水) 20:04:01 - bdbd
マウス肝臓のグリコーゲン測定を行う場合、凍結後破砕した組織でも測定可能ですか?また、ライセートと測定キットを使って測定された方がいらっしゃいましたら、うまくいくコツなど教えて頂けないでしょうか。

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