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培養ディッシュの変更 トピック削除
No.9429-TOPIC - 2021/01/14 (木) 16:33:13 - nmi

細胞培養半年くらいの初心者です

普段12ウェルプレートで培養している接着細胞を、最近60mmのディッシュで培養したら、うまく培養できませんでした。ちなみに初代培養から始める実験系です。培地の組成から、播種細胞数まで、考えられる条件はすべてスケールアップして計算していたのですが…

このように、なれない規格だと、理論上の相似形を用意しても、再現できないことはよくあることでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.9429-6 - 2021/01/15 (金) 21:33:54 - 研究医
どう上手く培養できないのか追記してください
偏るのか、絶滅したのか、グロースが遅いのか

(無題) 削除/引用
No.9429-5 - 2021/01/15 (金) 08:47:02 - ぽー
細胞を播種するdishが変わると、細胞が偏ってしまうことが多々あります。
特に、半径が小さくなるほど顕著になります。
そのため、12wellでは細胞が一部に偏ってしまったために細胞密度が一定水準以上になっていたのが、60mmでは均一になってしまって生着しなかったという学生を見たことがあります。

(無題) 削除/引用
No.9429-4 - 2021/01/15 (金) 03:03:12 - おお
>このように、なれない規格だと、理論上の相似形を用意しても、再現できないことはよくあることでしょうか?

厳密に条件を揃えてスケールを上げたということを確認した訳ではないですが起こり得る話かと思います。一般的にスケールアップは何らかの障害が出てくることはよくあることです。

と書いたものの概念的な話をしたところで解決はしませんので、どんな細胞を培養しようとしているのでしょうか?その細胞を実際に使っている人からのアドバイスが得られるかもしれませんので(開示してもいいなら)。

(無題) 削除/引用
No.9429-3 - 2021/01/14 (木) 21:00:45 - み
プレートとディッシュの違いだけに着目されているが、12 wellで育てていた細胞を剥がして60mmに移したのなら継代操作の不備も考えないといけない。
同時に同じ細胞集団を密度をあわせて分配して、一方のみが悪くなったのなら60mmの方の表面加工状態を疑う。

(無題) 削除/引用
No.9429-2 - 2021/01/14 (木) 16:54:26 - よっしー
12ウェルプレートと60mmディッシュのコーティング等も含め表面の処理は同一のものですか?
全く同一の細胞(同じ日に調製した同一チューブに入っている細胞)を密度を調整して,12ウェルプレートと60mmディッシュに播種して,全く同一の培地で培養したらどうなりますか?

培養ディッシュの変更 削除/引用
No.9429-1 - 2021/01/14 (木) 16:33:13 - nmi

細胞培養半年くらいの初心者です

普段12ウェルプレートで培養している接着細胞を、最近60mmのディッシュで培養したら、うまく培養できませんでした。ちなみに初代培養から始める実験系です。培地の組成から、播種細胞数まで、考えられる条件はすべてスケールアップして計算していたのですが…

このように、なれない規格だと、理論上の相似形を用意しても、再現できないことはよくあることでしょうか?

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