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組織透明化試薬のおすすめ トピック削除
No.9492-TOPIC - 2021/02/08 (月) 21:45:25 - 戸欄素把連斗
いつも勉強させていただいてます。
細胞塊をホールマウントで蛍光免疫染色し、
透明化処理後に共焦点顕微鏡等で三次元構造を解析したいと思っております。
各社から透明化試薬キット等販売されておりますが、
使い分けやおすすめ等ございますか?

対象の細胞塊は神経系で数百μm~1mm程度の大きさになります。
まずは簡便さとコストを重要視して選びたいと思っております。
よろしくおねがいします。
 
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No.9492-7 - 2021/02/09 (火) 23:51:00 - 戸欄素把連斗
みなさん情報ありがとうございます。
ScaleとCUBICがまず試してみるのによさそうですね。
まずは試薬の自作に挑戦してみたいと思います。
引き続き何か情報がありましたら是非ご教示ください。

(無題) 削除/引用
No.9492-6 - 2021/02/09 (火) 20:48:23 - kanekure
ウレアは吸熱だからホットスターラーは使ってます。
4Mは速く溶けるし最大10Mぐらいいけます。

(無題) 削除/引用
No.9492-5 - 2021/02/09 (火) 19:43:45 - とおりすがりのもの
尿素は溶けますよ。

4モルだと、スモールスケールで溶かすなら
9グラムちょっとを40mlまでメスアップくらいです。

(無題) 削除/引用
No.9492-4 - 2021/02/09 (火) 08:46:27 - AA
簡便さを求めるならScaleかCUBICですね。
どちらも試薬を購入して混ぜるだけです。
私の経験上もCUBICはよく働く印象です。

免疫染色との組み合わせの場合はiDISCOのほうがよいようです。あれも試薬のまぜあわせだけでできますが、溶媒がプラスチックを溶かすので観察に苦労します。
(開発者のサイトへいくと使い捨て用の自作容器の3Dプリンターデータを配布してます)

(無題) 削除/引用
No.9492-3 - 2021/02/09 (火) 06:09:47 - すごい
情報をありがとうございます。
スレ元ではないですが、面白そうですね。

4モルの尿素って、水に簡単に溶けますか?
そうなら、調整が楽そうですね。

それとも、加熱とか、何かすることが必要そうですね。

今まで、興味はあったけど、試薬代が高いと思い込んでいて
手を出さなかったので、やってみたいです。

(無題) 削除/引用
No.9492-2 - 2021/02/08 (月) 23:59:10 - kanekure
1mmの脳スライスなら自作Scale でいけた。
http://www.anticancerjapan.com/letters/letter17.pdf
脳全体も上手くやれば大丈夫できるんだろうけど個人的にはイマイチ。
脳全体は買ったキュービックが一番透明になった。

組織透明化試薬のおすすめ 削除/引用
No.9492-1 - 2021/02/08 (月) 21:45:25 - 戸欄素把連斗
いつも勉強させていただいてます。
細胞塊をホールマウントで蛍光免疫染色し、
透明化処理後に共焦点顕微鏡等で三次元構造を解析したいと思っております。
各社から透明化試薬キット等販売されておりますが、
使い分けやおすすめ等ございますか?

対象の細胞塊は神経系で数百μm~1mm程度の大きさになります。
まずは簡便さとコストを重要視して選びたいと思っております。
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