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(無題) 削除/引用 No.9579-5 - 2021/03/16 (火) 09:36:48 - ii 何日か飼っておける細胞だったら、siRNAのエレクトロポレーションとかで発現を潰せませんかね？ ただ他の方もおっしゃっているように、中和抗体で差がないのだったら、その経路は関与してないのかもしれないですね。 あるいはリガンドの量が多すぎて中和抗体による競合が利かなくなっているとか？

(無題) 削除/引用 No.9579-4 - 2021/03/16 (火) 00:50:04 - おお よくわからんけど、 たとえば刺激した細胞のCondition mediaを、他の細胞にかけるとか。 他の細胞はまあ色々あると思いますけど、Condition mediaになにか刺激のためのケミカルが入ってないなら同じさいぼうにかけるとかもありだし。 ケミカルなどが入っているならどうだろう、透析するとかすればいいかもしれないし、そのケミカルで反応が乏しい細胞にかけてもいいだろうし。 あるいはレポーターになるようなプラスミドを持つ細胞を使うてもあるかもしれない。 特定のものを想定していて、中和できる中和抗体でだめなら、その仮説を考え直したほうがいいのかもしれない。

(無題) 削除/引用 No.9579-3 - 2021/03/15 (月) 17:59:54 - dcfg有 以下の点を教えてください。 １. ある刺激によって、その受容体が発現することはすでにわかっているということでしょうか。発現とは遺伝子、タンパク質、（膜への移行、局在も含む）どのレベルで見た上で実験しているのでしょうか。 2. その受容体につながるシグナル伝達経路の関与を知りたいということでしょうか。であれば、何への関与を知りたいのでしょうか。 3. 着目しているシグナル伝達経路があって、その経路に当該受容体下流のシグナル伝達経路がどう関わるのかを知りたいのでしょうか。 4.

(無題) 削除/引用 No.9579-2 - 2021/03/15 (月) 17:59:20 - qq １）その時、その発現誘導受容体のリガンドはどうなっているの？ ２）「中和抗体を使ったけど効果が認められなかった」とのことですが、ポジコンを確認しました？

発現誘導受容体の関与の証明 削除/引用 No.9579-1 - 2021/03/15 (月) 17:31:39 - じょ シグナル伝達機構の解明研究で、定常状態ではほとんど発現してなく、ある刺激によって発現する受容体のシグナル伝達経路での関与を証明したいです。使用している細胞が免疫細胞である為、遺伝子編集が難しく、中和抗体を使用しましたが、差が見られませんでした。何かよいアイデアはありませんでしょう？ ぜひ、ご回答して頂けましたら幸いです。

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