Bio Technical フォーラム

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細胞が剥がれます トピック削除
No.9900-TOPIC - 2021/09/08 (水) 23:08:17 - DK
現在、研究室でiPS細胞からドパミン神経に誘導する実験を行っています。
ガラス8wellチャンバーで細胞を育てているのですが、すぐに剥がれてしまいます。メディチェンは半量交換で、かなりゆっくり行って振動を与えないようにしていますが、day6ぐらいで剥がれてしまいます。
1穴当たり20万で播いていますが、day1でwellの底が蜘蛛の巣のような形になっていて、おそらく剥がれていると思うのですが細胞数が足りないのでしょうか。
コート剤はiMatrix-511やOLFコートを試してみましたがどちらも同じように剥がれて神経に分化されませんでした。

何かいいコート剤、コート方法、または改善策を知っている方がいらっしゃいましたら、ご教授よろしくお願いします。
 
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No.9900-4 - 2021/09/11 (土) 00:04:35 - ふらいむ
しばらく前のトピックにも似たような話題が出てましたね。
細胞のガラスへの接着性が悪いようですので、
免疫染色用なら住友ベークのセルデスクや
ibidiのμSlide等のプラスチック製品を試してみてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.9900-3 - 2021/09/10 (金) 21:59:29 - kpnkjh
細胞が異なるので使えるかどうかわかりませんが、丸いカバーストリップはガラス製チャンバースライドよりは細胞の接着が早くてよく伸展して剥がれなかったです。どちらもガラスですが組成や表面が何か違うのかもしれないです。

(無題) 削除/引用
No.9900-2 - 2021/09/09 (木) 19:23:00 - ema
神経培養でガラスではどうしてもうまく生えなくて、培養自体はプラスチックボトムで、顕微鏡レンズを胆の倍率のみ長作動のプラスチック対応レンズ買って、入れ替えて観察した覚えがあります。

細胞が剥がれます 削除/引用
No.9900-1 - 2021/09/08 (水) 23:08:17 - DK
現在、研究室でiPS細胞からドパミン神経に誘導する実験を行っています。
ガラス8wellチャンバーで細胞を育てているのですが、すぐに剥がれてしまいます。メディチェンは半量交換で、かなりゆっくり行って振動を与えないようにしていますが、day6ぐらいで剥がれてしまいます。
1穴当たり20万で播いていますが、day1でwellの底が蜘蛛の巣のような形になっていて、おそらく剥がれていると思うのですが細胞数が足りないのでしょうか。
コート剤はiMatrix-511やOLFコートを試してみましたがどちらも同じように剥がれて神経に分化されませんでした。

何かいいコート剤、コート方法、または改善策を知っている方がいらっしゃいましたら、ご教授よろしくお願いします。

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