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EGFPの蛍光とIFによる蛍光の退色について トピック削除
No.9921-TOPIC - 2021/09/21 (火) 15:26:11 - まっちゃ
 学部4年です。

 初歩的な質問で恐縮ですが、蛍光免疫染色を行った際にEGFPの蛍光と蛍光標識二次抗体による蛍光は時間経過による退色の程度が異なるのはよくあることなのでしょうか。

 詳しい方がいらっしゃいましたら、ご教示頂けると幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.9921-2 - 2021/09/21 (火) 18:43:41 - AA
EGFP自身の蛍光と、同波長帯の標識色素の蛍光、ということでしょうか。

もともとの蛍光強度も違いますし、タンパク自身の数とそれにくっつく色素は違ったりしますから一概には言えないでしょうが、経験上、蛍光タンパク質のほうが蛍光色素よりも早く褪色します。
当てるレーザーの調整次第ですがCFPなんかだと加算平均のための1回目のスキャンと最後のスキャンで見た目がぜんぜん違うこともあります。

EGFPの蛍光とIFによる蛍光の退色について 削除/引用
No.9921-1 - 2021/09/21 (火) 15:26:11 - まっちゃ
 学部4年です。

 初歩的な質問で恐縮ですが、蛍光免疫染色を行った際にEGFPの蛍光と蛍光標識二次抗体による蛍光は時間経過による退色の程度が異なるのはよくあることなのでしょうか。

 詳しい方がいらっしゃいましたら、ご教示頂けると幸いです。

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