Bio Technical フォーラム

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tet-offシステム トピック削除
No.10343-TOPIC - 2022/03/16 (水) 07:47:23 - 院生
大学院生です。とある実験でtet-offシステムを使いたいのですが、いくつか質問があります。
メダカ受精卵へプラスミドを導入して、目的遺伝子を発現させたいです。

・TRE領域(tetO)とプロモーター(PminCMV)の間が離れていても(500bp程度)制御可能か?
・目的遺伝子のプロモーターは既製品ではPminCMVであるが、他の組織特異的プロモーターに変更可能か?

以上2点ご教授いただけましたら幸いです。よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.10343-2 - 2022/03/16 (水) 09:50:53 - AA
TetRにくっついてるVP16の距離感になるのでminimalCMVと距離が開くのは悪い影響があると思います。
またTRE誘導可能な組織特異的プロモーターというのは殆ど知られていないと思います。
既知の特異的プロモーターをどんどん短くしていって試すことはできるかもしれません。(大抵の場合はTRE関係なしにON/OFFになると思います)

tet-offシステム 削除/引用
No.10343-1 - 2022/03/16 (水) 07:47:23 - 院生
大学院生です。とある実験でtet-offシステムを使いたいのですが、いくつか質問があります。
メダカ受精卵へプラスミドを導入して、目的遺伝子を発現させたいです。

・TRE領域(tetO)とプロモーター(PminCMV)の間が離れていても(500bp程度)制御可能か?
・目的遺伝子のプロモーターは既製品ではPminCMVであるが、他の組織特異的プロモーターに変更可能か?

以上2点ご教授いただけましたら幸いです。よろしくお願いします。

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