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(無題) 削除/引用 No.10559-17 - 2022/06/23 (木) 18:34:52 - て 励起は同じくらいでも蛍光波長が違うからDAPIでいいということにはならないかと... 個人的にはEtBrは処理が面倒くさいからあんまり使いたくないけど

(無題) 削除/引用 No.10559-16 - 2022/06/23 (木) 11:45:09 - あ つまりDAPIでいいということだよね

(無題) 削除/引用 No.10559-15 - 2022/06/22 (水) 20:22:08 - あの メーカーによると、励起は同じ波長で、蛍光は別の波長フィルターで撮影するという手があるらしいです。

(無題) 削除/引用 No.10559-14 - 2022/06/22 (水) 07:35:36 - あ DAPIが使えないのにEtbrが使えるの？ どちらも300くらいのUVだよね

(無題) 削除/引用 No.10559-13 - 2022/06/22 (水) 00:39:56 - おお あ、そうそうPropidium Iodide（PI）はRNAも染色しちゃうからサイトゾルでもシグナルが見えてしまうかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.10559-12 - 2022/06/21 (火) 05:05:38 - あの その後、メインに考えている、特殊な染色法の試薬の、テクニカルサポートからは 、Etbrを推奨されました。 とりあえず、それでやってみます。

(無題) 削除/引用 No.10559-11 - 2022/06/20 (月) 15:12:25 - 散々 このDNA/RNA用蛍光色素でどれが良かったですか？と質問すれば、 答える方も分かりやすい。 https://www.bc-cytometry.com/FCM/sikisohyou-chart.html Hoechst33342 DyeCycle Violet Chromomycin A3 PI YOYO-1 CPO Pyronin　Y 7-AAD Ethidium homodimer-1 SYTO9 SYBR　Green I LDS751 DRAQ5 DRAQ7 TO-PRO-3

(無題) 削除/引用 No.10559-10 - 2022/06/20 (月) 14:42:59 - こんなの 使ったことはないですけどFar Red系の試薬がいくつかあったと思います。 https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/S34900 こちらはFACS用の試薬の一覧です https://www.thermofisher.com/jp/ja/home/life-science/cell-analysis/flow-cytometry/flow-cytometry-assays-reagents/cell-cycle-assays-flow-cytometry.html#fixedcellcycle

(無題) 削除/引用 No.10559-9 - 2022/06/19 (日) 12:09:35 - あの Toto様　ありがとうございました。 Aaa様 賦活化は特に何もしません。

(無題) 削除/引用 No.10559-8 - 2022/06/19 (日) 09:56:12 - aaa 主題とずれて申し訳ないのですが、ご質問があります 4%PFAで16時間固定して凍結切片を作製されるとのことですが、 免疫染色もされるのでしょうか？ もしそのときは、賦活化はどのようにされているのでしょうか？ よろしくおねがいいたします。

(無題) 削除/引用 No.10559-7 - 2022/06/18 (土) 18:45:47 - toto ええ、ToPro3を使うときは、ほぼ405、488、561nm励起との4色観察ですので。Alexa488, 546と使ってますよ。ただ、もちろん、クロストークには神経を使います。Topro3の濃度と時間は前もってベストの条件を決めることが必要で、DAPIのようなわけにはいきません。少々気を使うので、なるべくTopro3を使わなくてすむようにまずは組み合わせを考えますが。まじめにやればTopro3でも大丈夫です。

(無題) 削除/引用 No.10559-6 - 2022/06/18 (土) 17:26:00 - あの Toto様 ありがとうございます。 Alexa488標識第二抗体 と Alexa546標識第二抗体 を組み合わせて マルチカラーの染色を凍結切片で実施できるとありがたいのですが、 同様の目的に御紹介いただいた商品を用いたご経験はありますでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.10559-5 - 2022/06/18 (土) 17:05:40 - toto UV領域が使えない場合は昔invitrogenのToPro-3 Iodide というのをずっと使ってますが、核染だけなら使えます。ただ、DAPIやヘキストのほうがバックが抜けやすく美しいですが。

(無題) 削除/引用 No.10559-3 - 2022/06/18 (土) 16:21:37 - あの おおさま 早速の御回答をいただきながら、誠に恐縮ですが、次の２つの理由からダメです （１）注意として次が書かれています Note: BioTracker Nuclear Dyes also shows blue fluorescence in the DAPI channel, and may not be suitable for multicolor imaging with blue probes. （２）価格の提示がないので、どうやら販売していないようです

(無題) 削除/引用 No.10559-2 - 2022/06/18 (土) 13:25:26 - おお https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/mm/sct120 こんなんあったよ

DAPIを代替する蛍光色素, 凍結切片で 削除/引用 No.10559-1 - 2022/06/18 (土) 10:48:12 - あの どうぞよろしくお願いいたします。 次の条件で、動物細胞の核染色（DNA）で、DAPIを代替する蛍光色素はどのメーカーのどれが良いか教えてください。 材料：４％PFAで16時間程度固定した、哺乳動物組織の凍結切片（10〜15um程度の厚さ） 共焦点顕微鏡（ツアイスLSM710)で写真撮影：　 　ただし今回の研究では、DAPI用のレーザーやバンドパスフィルターは他目的の為に使えない 　Alexa488か、Alexa546か、Alexa647のためのレーザーやバンドパスフィルターは、今回探している核染色用蛍光色素に使える Propidium Iodide（PI）も考えられますが、凍結切片でも安定して使えるかどうかに不安を感じます。

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