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蛍光標識抗体の選び方 トピック削除
No.10980-TOPIC - 2022/11/24 (木) 03:06:23 - 細胞屋
フローサイト用と表示されている蛍光標識抗体は、フローサイトを行わなず、ただ顕微鏡下で蛍光を観察することもできますか?
 
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No.10980-6 - 2022/11/24 (木) 08:29:57 - 1
フローサイトメトリー (FCM)と蛍光抗体法(IF)で蛍光抗体の構造に何か明らかな違いがあるわけではないと思います。通常はいずれかで使っているものはもう一方でも使ってます。ていうか固定の有無や方法などの条件が基本邸に同一であれば、FCMで使えるなら(添付書類に書いてなくても)IFでもいけるだろうみたいな感じでやってます。

ただFCMにおいて未固定の検体でのみ使用可能みたいな(つまり天然状態の抗原タンパク質とのみ反応する様な)抗体の場合、固定したIFの検体には使えないとかはあるかもしれません。これはFCM用、IF用というよりもその抗体自体の特性に起因するものですが。
その様な場合に、どうしてもIFでつかいたいということならば、FCMの時の条件に準じた方法で
IFを行うとか必要かもしれませんが、これはこれでややこしくなり、いつもうまくいくとは限らないですので、特別な事情がないならばIF適用可能な抗体を買う方が賢明です。

(無題) 削除/引用
No.10980-5 - 2022/11/24 (木) 08:05:33 - おお
Live Cell ImagingようのAnti-fade溶液とかもあるようなので、固定するでもなくフローサイトの要領で染めてそのまま(生きたまま)見たいのであれば、そういう商品を使えば扱いやすくなるのではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.10980-4 - 2022/11/24 (木) 07:29:24 - おお
ん、フローサイトに流すべく方法で染色してそのまま見たということでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.10980-3 - 2022/11/24 (木) 07:22:23 - おお
色素はIFと共通しているので(そうでないものもあるかもしれないが)大抵は染色できると思うし、そういう色素ならIFで特段使いにくいとかないと思うけど。
表面抗原のときは特にフローサイトでは固定せずに使うのでその辺でうまくいく行かないがある抗体はもしかしたらあるかもしれない。

退色したのはなんだろう。退色防止剤との相性が悪かったのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.10980-2 - 2022/11/24 (木) 04:51:39 - あふ
波長とフィルタがあっていれば、できなくはない。以前、どうしてもやらざるを得なかったのでやったことがあるが、一回レーザーを当てただけですぐに褪色してしまったので画像取得に難渋した。

蛍光標識抗体の選び方 削除/引用
No.10980-1 - 2022/11/24 (木) 03:06:23 - 細胞屋
フローサイト用と表示されている蛍光標識抗体は、フローサイトを行わなず、ただ顕微鏡下で蛍光を観察することもできますか?

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